Leica倒置顯微鏡是一種特殊設計的顯微鏡,其物鏡位于載物臺下方,而光源和聚光器位于載物臺上方,與普通顯微鏡結構相反。這種設計使其特別適用于觀察培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶中的活細胞及較厚的生物樣本,在細胞生物學、組織工程、藥物篩選等領域得到廣泛應用。
倒置顯微鏡的核心優(yōu)勢在于其長工作距離物鏡,能夠直接對培養(yǎng)容器中的細胞進行觀察,無需將細胞轉移至載玻片,減少了樣本處理步驟,更有利于保持細胞的活性與自然狀態(tài)。同時,倒置顯微鏡支持多種觀察模式,如明場、相差、熒光、微分干涉(DIC)等,可滿足不同的實驗需求。例如,相差觀察無需染色即可清晰呈現(xiàn)活細胞結構,熒光觀察則可對特定蛋白或細胞器進行標記分析。
Leica倒置顯微鏡的日常保養(yǎng)方法如下:
一、清潔與除塵
外部清潔
使用柔軟的干布(如鏡頭紙、麂皮等)擦拭顯微鏡的外殼,包括鏡臂、鏡筒、載物臺等部分,去除灰塵和污漬。注意不要使用濕布,以免水分進入儀器內(nèi)部造成損壞。如果有頑固的污漬,可以使用少量的中性清潔劑,但要確保清潔劑不會對儀器表面造成腐蝕或掉色。
定期檢查顯微鏡的標簽和標識,確保其清晰可讀。如果標簽有脫落或模糊的情況,要及時更換,以便于操作人員正確使用儀器。
光學部件清潔
物鏡和目鏡的清潔:對于物鏡和目鏡,要用專門的鏡頭清潔紙或干凈的軟毛刷輕輕擦拭,去除灰塵。如果鏡頭上有油污或指紋,可以使用少量的一醚或酒精(要小心使用,避免液體流入鏡頭內(nèi)部)。擦拭時要從鏡頭中心向外呈螺旋狀輕輕擦拭,避免劃傷鏡頭。
聚光鏡的清潔:聚光鏡也需要定期清潔,使用和物鏡相同的清潔方法。同時,要檢查聚光鏡的光圈是否能夠正常調(diào)節(jié),并且保持光圈葉片的清潔,以確保光線能夠準確地通過。
載物臺清潔
每次使用后,要清理載物臺上的樣品殘留。如果是普通的灰塵或碎屑,可以用軟毛刷掃去;如果有液體殘留,要用干凈的紙巾或吸水紙吸干,然后用清水或適當?shù)娜軇┎潦酶蓛簟τ谝恍┱承缘臉悠窔埩?,可以使用少量的溫和清潔劑,但要注意不要讓清潔劑接觸到載物臺的內(nèi)部機械結構。
二、檢查與校準
光源檢查
檢查照明光源(如鹵素燈、LED燈等)是否正常工作。觀察光源的亮度是否均勻,是否有閃爍或熄滅的情況。對于可以調(diào)節(jié)亮度的光源,要檢查亮度調(diào)節(jié)旋鈕是否能夠正常工作,并且在不同的亮度設置下,光線的強度是否穩(wěn)定。
如果光源是燈泡型的,要關注燈泡的使用壽命。當燈泡的亮度明顯下降或者出現(xiàn)異常情況時,要及時更換燈泡。在更換燈泡時,要注意選擇與原型號相匹配的燈泡,并且按照正確的操作方法進行更換,避免觸電和損壞儀器。
調(diào)焦系統(tǒng)檢查
檢查粗調(diào)焦旋鈕和細調(diào)焦旋鈕是否能夠正常轉動,并且調(diào)焦是否順暢。在調(diào)焦過程中,要注意觀察載物臺和物鏡之間的距離變化,確保它們不會發(fā)生碰撞。如果調(diào)焦旋鈕有松動或卡頓的情況,要及時進行維修或緊固。
定期檢查調(diào)焦機構的精度??梢酝ㄟ^放置一個已知厚度的標準樣品(如蓋玻片),觀察在不同焦距下樣品的成像情況,判斷調(diào)焦是否準確。如果發(fā)現(xiàn)調(diào)焦不準確,可能需要對調(diào)焦機構進行校準或調(diào)整。
光路校準
檢查光路是否準直??梢酝ㄟ^觀察視場中的光線是否均勻分布、圖像是否清晰來判斷光路是否正常。如果發(fā)現(xiàn)光路有問題,可能是物鏡、聚光鏡或其他光學部件的位置發(fā)生了偏移,需要按照儀器的操作手冊進行光路校準。
對于帶有多種觀察模式(如明場、暗場、熒光等)的倒置顯微鏡,要檢查不同觀察模式之間的切換是否正常,并且在切換后要檢查光路是否需要重新校準。例如,在切換到熒光觀察模式時,要確保激發(fā)光和發(fā)射光的光路正確,并且熒光濾光片的位置準確。
三、機械部件維護
載物臺維護
檢查載物臺的移動是否平穩(wěn)。在X-Y軸方向移動載物臺時,要注意觀察是否有卡頓或跳動的情況。如果有,可能是載物臺的導軌需要清潔或潤滑。可以使用少量的潤滑油(如硅油)滴在導軌上,然后來回移動載物臺,使?jié)櫥途鶆蚍植迹⒁獠灰褂眠^多的潤滑油,以免沾染樣品。
檢查載物臺的鎖定裝置是否正常工作。當載物臺移動到指定位置后,鎖定裝置應該能夠牢固地固定載物臺,防止其在觀察過程中發(fā)生移動。如果鎖定裝置有問題,要及時進行維修或更換。
物鏡轉換器維護
檢查物鏡轉換器是否能夠正常轉動,并且物鏡的切換是否準確。在轉動轉換器時,要注意手感是否順暢,有沒有松動或過緊的情況。如果轉換器有問題,可能會導致物鏡不能準確地進入光路,影響觀察效果。
定期清潔物鏡轉換器的接口部分,去除灰塵和油污,以確保物鏡能夠緊密地安裝在轉換器上,保證光學性能。
其他機械部件檢查
檢查顯微鏡的底座是否穩(wěn)固,各連接部件(如鏡臂與底座的連接、載物臺與支架的連接等)是否松動。如果發(fā)現(xiàn)有松動的部件,要及時擰緊螺絲,以確保儀器的整體穩(wěn)定性。
對于一些有升降功能的部件(如鏡筒的升降),要檢查其升降是否靈活,并且定位是否準確。在升降過程中,要注意觀察部件的運動是否平穩(wěn),有無異常響聲。
四、存放與環(huán)境維護
正確存放
當顯微鏡使用完畢后,要將物鏡轉換到低倍數(shù)的物鏡位置,關閉光源,并將調(diào)焦旋鈕調(diào)整到合適的位置,避免物鏡和載物臺過度擠壓。然后將顯微鏡罩上防塵罩,放在干燥、通風的柜子或箱子中存放。
如果顯微鏡需要長時間存放,可以在存放前將光學部件和載物臺等部分用干燥劑包裹起來,防止受潮。同時,要定期(如每月)取出顯微鏡進行檢查和清潔,確保儀器在存放期間不會受到損壞。
環(huán)境控制
倒置顯微鏡應該放置在溫度和濕度相對穩(wěn)定的環(huán)境中。理想的溫度范圍一般在15-25℃,濕度范圍在40%-60%。溫度過高或過低可能會導致儀器的光學性能下降、機械部件變形或損壞;濕度過大可能會引起鏡頭發(fā)霉、金屬部件生銹等問題。
避免將顯微鏡放置在靠近窗戶、空調(diào)出風口或暖氣旁邊等溫度和濕度變化較大的地方。同時,要注意保持實驗室的清潔,減少灰塵和化學物質(zhì)對顯微鏡的污染。
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