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IHC常見問題分析及處理

來源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2025年06月12日 14:36  

問題

原因

建議

結(jié)果中顯色過深

抗?jié)舛冗^高或孵育時間過長

降低一抗?jié)舛然驕p少孵育時間

孵育溫度過高

室溫或4℃孵育

辣根標(biāo)記二抗教育時間長

縮短時間

IHS結(jié)果中非常異色顯著

石蠟切片脫蠟不徹底

延長脫蠟時間

操作過程中沖洗不充分

增加沖洗的次數(shù)與沖洗時間

組織富含內(nèi)源性的生物素與過氧化物酶

使用相關(guān)試劑進行封閉

發(fā)生抗原異位


蛋白封閉不充分

增加蛋白封閉時間

IHS弱結(jié)果中顯色強

抵抗力過低或教育時間過短

增加一抗?jié)舛然蜓娱L孵育時間

試劑超過保質(zhì)期

實驗前確認(rèn)試劑的保質(zhì)期

操作過程沖洗過度

適度沖洗

IHS結(jié)果中無染色

組織中無目的抗原的表達


一抗種屬來源與二抗不匹配

實驗前確認(rèn)一抗的種屬來源

色物質(zhì)與辣根系統(tǒng)不匹配

實驗前確認(rèn)顯色體系

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