Alexa Fluor 647-Streptavidin,鏈霉親和素的結(jié)構(gòu)與功能
試劑簡介
Alexa Fluor 647-Streptavidin 是一種結(jié)合了 Alexa Fluor 647 熒光染料與鏈霉親和素(Streptavidin) 的生物偶聯(lián)物,應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究中的熒光標(biāo)記、檢測和成像。
Alexa Fluor 647 的化學(xué)與光譜特性
分子結(jié)構(gòu):Alexa Fluor 647(AF647)是一種共軛雙環(huán)結(jié)構(gòu)的熒光染料,含兩個(gè)苯環(huán)和一個(gè)吡啶環(huán),通過多個(gè)共軛雙鍵連接,分子量約 939.03。
溶解性:水溶性良好,且在 pH 4-10 范圍內(nèi)穩(wěn)定,可溶于 DMSO、DMF、水等溶劑。
光穩(wěn)定性:相較于傳統(tǒng)染料(如 Cy5),AF647 具有較強(qiáng)的抗光漂白能力,適合長時(shí)間成像。
鏈霉親和素(Streptavidin)的結(jié)構(gòu)與功能
四聚體結(jié)構(gòu):Streptavidin 是由 Streptomyces avidinii 產(chǎn)生的四聚體蛋白(分子量約 60 kDa),每個(gè)單體含 159 個(gè)氨基酸,形成 β-桶狀結(jié)構(gòu),每個(gè)亞基可結(jié)合一個(gè)生物素分子。
結(jié)合特性:與生物素的親和力較高,主要通過氫鍵和范德華力相互作用實(shí)現(xiàn),結(jié)合后結(jié)構(gòu)發(fā)生構(gòu)象變化以穩(wěn)定復(fù)合物。
試劑信息
驗(yàn)證的反應(yīng)性:人, 小鼠, 大鼠, 所有物種
配方:磷酸鹽緩沖溶液,pH 7.2。
制備:在良好的條件下,鏈霉親和素與 Alexa Fluor® 647 偶聯(lián)。
濃度:0.5 mg/ml(濃度與偶聯(lián)物中僅鏈霉親和素成分有關(guān))
運(yùn)輸方式:冰袋運(yùn)輸
純度標(biāo)準(zhǔn):≥95%
保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。
應(yīng)用說明:
當(dāng)與生物素化一抗結(jié)合使用時(shí),鏈霉親和素-Alexa Fluor 647 可用作間接免疫熒光染色的第二步試劑。鏈霉親和素-Alexa Fluor 647 的平均分子量為 60 kD,單獨(dú)的鏈霉親和素為 52 kD。
緩沖體系:
0.005 M 磷酸鈉 + 0.125 M 氯化鈉(pH 7.6),含 7.5 mg/mL BSA(無 IgG 和蛋白酶)及防腐。
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