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ELISA實驗中洗滌步驟的常見錯誤有哪些?

來源:本生(天津)健康科技有限公司   2025年06月17日 09:36  

  ELISA實驗中洗滌步驟的常見錯誤有哪些?

  以下是天津本生對ELISA實驗中洗滌步驟的常見錯誤及對應的解決方案,綜合實驗關(guān)鍵環(huán)節(jié)與優(yōu)化建議:

  一、洗滌液配置與使用錯誤

  緩沖液選擇不當?

  錯誤:直接使用純PBS(不含Tween-20)洗滌,導致非特異性結(jié)合殘留。

  解決:需使用含0.05%-0.2% Tween-20的PBST緩沖液,降低表面張力增強洗滌效果。

  洗液溫度過低?

  錯誤:冬季未預熱洗液,導致洗滌不(“花板”現(xiàn)象)。

  解決:洗液溫度應維持在20-30℃,避免低溫影響去污效果。

  二、手工操作失誤

  洗滌不凈

  錯誤:洗液未注滿孔或靜置時間不足(<1分鐘),殘留未結(jié)合物質(zhì)。

  解決:每孔注滿洗液后靜置1-2分鐘,重復3-5次,拍板時垂直扣干。

  拍板動作不規(guī)范?

  錯誤:左右甩動板子導致孔間交叉污染。

  解決:垂直扣板于吸水紙上,避免液體飛濺。

  三、洗板機操作問題

  參數(shù)設置錯誤?

  錯誤:吸液殘留量>2μL或吸頭高度不當,導致液體殘留。

  解決:調(diào)整吸頭距孔底0.5-1mm,每日校準注液量。

  維護不足?

  錯誤:未定期清潔吸頭,造成堵塞或污染。

  解決:每周用10%次氯酸鈉沖洗管路,更換堵塞吸頭。

  四、其他常見錯誤

  錯誤類型? ?后果? ?解決方案?

  洗滌次數(shù)不足? 高背景信號(假陽性) 增加至5-6次,最后一次延長靜置時間

  洗液過期/污染? 絮狀物堵塞孔底 現(xiàn)配現(xiàn)用,過濾混濁洗液

  封閉后未充分洗? 非特異性吸附增加 封閉后PBST洗滌3次,去除BSA

  五、本生試劑盒特別提示

  顯色前處理?:最后一次洗滌后需拍干,避免殘留液體稀釋底物導致顯色異常。

  邊緣效應?:外圈孔易殘留液體,建議棄用或單獨處理。

  通過規(guī)范操作可減少80%的洗滌相關(guān)誤差。若問題持續(xù),建議聯(lián)系技術(shù)支持獲取定制化方案。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細說明,可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。

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