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液相色譜柱的正確存放方式是確保其性能穩(wěn)定、延長使用壽命的關鍵。不當?shù)拇娣趴赡軐е轮陆?、固定相損傷或污染，甚至造成不可逆的損壞。以下是關于液相色譜柱存放的詳細指南，涵蓋操作步驟、環(huán)境要求及注意事項。
一、使用后的預處理
1. 沖洗色譜柱
- 目的：清除殘留樣品、緩沖鹽、雜質(zhì)或腐蝕性溶劑，防止析出結晶或滋生微生物。
- 操作：
- 反相柱(C18等)：先用純水沖洗10-15倍柱體積，再用甲醇或乙腈置換水分，最終保存于有機相(如甲醇:水=1:1或純有機溶劑)。
- 正相柱(硅膠、氨基柱等)：用正己烷或異丙醇沖洗，避免接觸水分。
- 離子交換柱：用高純度水或低濃度鹽溶液沖洗，去除高鹽緩沖液。
- 注意：沖洗流速需低于分析流速(如0.5 mL/min)，避免壓力沖擊損傷填料。
2. 排除氣泡并封端處理
- 沖洗后，用封端溶劑(如0.05% TFA或醋酸)低速沖洗，封閉硅膠表面殘余硅羥基，減少堿性物質(zhì)吸附。
- 排出柱內(nèi)氣泡，確保填料浸潤溶劑。
二、存放環(huán)境要求
1. 溫度控制
- 理想溫度：4-30℃(避免凍結或高溫導致填料收縮/膨脹)。
- 長期存放時，建議冷藏(如4℃)，但需防止冷凍(水相可能結冰脹裂柱子)。
2. 濕度與避光
- 環(huán)境濕度≤60%RH，避免潮濕導致金屬接頭銹蝕或霉菌生長。
- 避光保存，防止光照引發(fā)溶劑分解或固定相結構變化。
3. 防震與防塵
- 平放于穩(wěn)定臺面，避免垂直放置(重力可能導致填料沉降)。
- 使用柱套或保鮮膜包裹柱子，防止灰塵污染接頭。
三、密封與溶劑保護
1. 溶劑選擇原則
- 反相柱：保存于甲醇、乙腈或甲醇:水(1:1)混合液中，避免純水導致填料塌陷。
- 正相柱：用正己烷、異丙醇等非極性溶劑密封，嚴禁接觸水分。
- 特殊柱(如手性柱、生物酶柱)：遵循廠商推薦的專用保存液(如含疊氮鈉的緩沖液)。
2. 密封方式
- 安裝柱堵頭或封口螺帽，確保柱床與外界隔絕。
- 若短期存放(<1周)，可保留流動相并密封兩端；長期存放需更換新鮮溶劑。
3. 溶劑揮發(fā)預防
- 使用高純度、低揮發(fā)性的溶劑(如色譜純甲醇)，定期檢查液面，避免填料干燥。
- 揮發(fā)性溶劑(如乙酸乙酯)需密封后置于陰涼處。
四、物理保護與標簽管理
1. 防壓防彎
- 禁止堆放重物或擠壓柱子，避免柱管變形導致流型紊亂。
- 搬運時輕拿輕放，防止碰撞接頭。
2. 標簽與記錄
- 標明柱子型號、填料類型、保存溶劑及存放日期，便于快速識別。
- 記錄使用次數(shù)、最后一次沖洗溶劑及保存狀態(tài)，用于追蹤性能變化。
五、特殊情況處理
1. 蛋白或生物樣品殘留
- 用0.5% SDS或尿素溶液沖洗，再依次用高濃度有機溶劑和水交替沖洗，去除蛋白質(zhì)。
2. 強酸性/堿性溶劑污染
- 立即用中性溶劑(如甲醇)充分沖洗，避免長時間接觸pH環(huán)境。
3. 鹽析堵塞
- 用熱水(60℃以下)或稀硝酸沖洗溶解無機鹽，隨后用純水和有機溶劑置換。
六、重啟使用前的準備工作
1. 平衡柱子
- 安裝后，用保存溶劑以低流速(0.2-0.5 mL/min)沖洗15-30分鐘，排空氣泡并恢復柱溫。
2. 梯度測試
- 進行空白梯度測試(如甲醇-水梯度)，檢查基線平穩(wěn)性和保留時間重現(xiàn)性，確認柱效正常。
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