表面等離子體共振(SPR)互作儀的相互作用技術基于光學原理,通過監(jiān)測金屬表面等離子體共振現(xiàn)象,實時、無標記地檢測生物分子間的相互作用。以下是該技術的核心要點:
原理
表面等離子體共振現(xiàn)象:當光線與金屬表面上的等離子體振蕩相互作用時,會發(fā)生共振現(xiàn)象。在SPR實驗中,通常將一種生物分子(例如蛋白)固定在金屬表面上,通過流動含有另一種生物分子(例如配體)的溶液,當它們相互結合時,會引起共振角發(fā)生變化。
折射率變化:SPR技術的原理基于光的折射率變化與金屬表面附近介質(zhì)的折射率變化相關。當生物分子(如蛋白質(zhì)、核酸等)與金屬表面結合時,會改變金屬表面附近的折射率,進而影響表面等離子體的共振條件。
信號檢測:通過監(jiān)測入射光的強度變化,可以實時監(jiān)測生物分子間的相互作用過程。當芯片表面的質(zhì)量發(fā)生變化時,SPR角度也會隨之發(fā)生變化,芯片表面質(zhì)量變化與SPR角度(RU值)變化呈現(xiàn)線性關系。
技術特點
實時監(jiān)測:能夠?qū)崟r、動態(tài)地監(jiān)測生物分子間的結合過程,獲取結合動力學參數(shù)(如結合常數(shù)、解離常數(shù)等)。
無標記檢測:待分析物無需標記,避免了標記物對生物分子活性的影響。
高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的生物分子相互作用,如檢測芯片表面1pg/mm²(1RU,Biacore系列儀器)的物質(zhì)變化。
廣泛應用:適用于多種生物分子的相互作用研究,包括蛋白、多肽、抗原/抗體、核酸、有機小分子、脂類、膜相關分子、多糖、中草藥/民族藥、高分子材料、細胞、細菌、病毒等。
應用領域
疾病分子機制研究:研究藥物與靶點結合的特異性、親和力、動力學等。
結構生物學:分析復合體的組裝、基于構象變化的互作熱力學。
藥物研發(fā):進行靶向分子篩選、藥物-靶點互作的綜合性表征、化藥小分子的檢測、分級與結構優(yōu)化、藥物代謝與藥效動力學檢測等。
蛋白質(zhì)組學:分析熱力學參數(shù)(ΔG、ΔH、ΔS),篩選能和已知分子結合的活性分子。
食品安全與環(huán)境監(jiān)測:用于疾病篩查、食品安全檢測等領域。
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