手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
氨基酸自動分析儀從樣品處理到結(jié)果輸出的標(biāo)準(zhǔn)化手冊
氨基酸自動分析儀通過離子交換色譜與柱后衍生技術(shù)，可實現(xiàn)食品、生物樣本中氨基酸的精準(zhǔn)定量。本文以蛋白質(zhì)水解樣品檢測為例，系統(tǒng)梳理其操作步驟與關(guān)鍵注意事項，助力用戶高效完成分析任務(wù)。
一、前期準(zhǔn)備：試劑與儀器校準(zhǔn)
1.試劑配置
緩沖液：按說明書配制pH2.2、3.3、4.0的檸檬酸-磷酸鈉緩沖液，0.45μm濾膜過濾后超聲脫氣15分鐘。
衍生試劑：稱取茚三酮溶于乙二醇甲醚，加入氯化亞錫（抗氧化劑），現(xiàn)配現(xiàn)用，避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：用0.02N鹽酸溶解氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)品，配制成0.5-10μmol/L梯度溶液。
2.儀器檢查
開啟氮氣（壓力0.05-0.1MPa）、純水機(jī)及儀器電源，預(yù)熱30分鐘。
檢查泵頭無氣泡、色譜柱連接緊密，用超純水沖洗管路至基線平穩(wěn)。
二、樣品處理：水解與衍生化
1.蛋白質(zhì)水解
稱取50-100mg樣品于水解管，加入10mL 6N鹽酸及0.5mL苯酚（指示劑），充氮氣后密封。
110℃水解22-24小時，冷卻后過濾，取1mL濾液60℃真空干燥，用0.02N鹽酸復(fù)溶至10mL，過0.22μm濾膜。
2.游離氨基酸提取
血清、尿液等液體樣品直接與4%磺基水楊酸按1:3混合，4℃離心（12000rpm，10分鐘），取上清液稀釋至檢測范圍。
三、儀器操作：參數(shù)設(shè)置與運行
1.方法建立
在軟件中設(shè)置梯度洗脫程序：0-10分鐘緩沖液A（pH2.2），10-30分鐘線性切換至B（pH3.3），30-50分鐘切換至C（pH4.0），流速0.45mL/min。
衍生溫度115℃，檢測波長570nm（主）、440nm（副），進(jìn)樣量20μL。
2.序列運行
將標(biāo)準(zhǔn)品與樣品按順序放入自動進(jìn)樣器，啟動序列。儀器自動完成進(jìn)樣、分離、衍生及檢測，生成色譜圖。
四、數(shù)據(jù)分析與報告生成
1.定性定量
通過保留時間比對標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖，定性氨基酸種類；以外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法計算濃度，回收率需達(dá)95%-105%。
2.報告輸出
軟件自動生成Excel或PDF報告，包含樣品名稱、濃度、RSD值及色譜圖。異常峰需手動檢查是否為雜質(zhì)或共洗脫峰。
五、儀器維護(hù)與注意事項
1.日常維護(hù)
每日用超純水沖洗泵及管路，每周更換保護(hù)柱芯，每月校準(zhǔn)儀器線性度（R2≥0.999）。
2.故障處理
若基線漂移，檢查茚三酮溶液是否氧化；若峰形拖尾，用0.1N NaOH沖洗色譜柱30分鐘。
氨基酸自動分析儀通過標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，可實現(xiàn)ppb級檢測限與±2% RSD的重復(fù)性。從樣品前處理到數(shù)據(jù)輸出，每一步均需嚴(yán)格遵循參數(shù)設(shè)置與質(zhì)量控制要求，以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心