一、目的要求
　　1. 學(xué)會(huì)使用內(nèi)標(biāo)法定量測(cè)定；
　　2. 學(xué)會(huì)熟練使用FID。
　　3. 學(xué)會(huì)測(cè)定峰高校正因子。
二、方法原理
    DNP柱是中等極性的色譜，在一定的色譜操作條件下可對(duì)一些簡(jiǎn)單的苯系化合物進(jìn)行*的分離。
三、儀器與試劑
　　1.儀器：成都科捷分析儀器公司生產(chǎn)的GC-5890氣相色譜儀、氣體發(fā)生器、實(shí)驗(yàn)三制備的色譜柱、FID、微量注射器 、2支1ml通用注射器、5ml容量瓶
　　2.試劑：苯、甲苯（以上均為分析純）。丙酮洗針液
四、實(shí)驗(yàn)步驟
　　1．配制標(biāo)準(zhǔn)溶液  稱一干燥潔凈的5ml容量瓶質(zhì)量，（稱準(zhǔn)至0.001g），用醫(yī)用注射器吸取1ml甲苯注入容量瓶?jī)?nèi)，稱重，計(jì)算出甲苯質(zhì)量，再用另一支注射器取0.2ml苯注入容量瓶，再稱重，求出瓶中苯的質(zhì)量（稱準(zhǔn)至0.001g），搖勻備用。
　　2. 配制甲苯試樣溶液  另取一干燥潔凈的試劑瓶，先稱出瓶的質(zhì)量，然后用注射器吸取1ml甲苯試樣，注入瓶中，稱出（瓶和甲苯）質(zhì)量，再求出甲苯試樣質(zhì)量。再用另一支注射器取0.1ml苯（內(nèi)標(biāo)物）注入容量瓶，再稱重，求出瓶中苯的質(zhì)量（稱準(zhǔn)至0.001g），搖勻備用。
　　3. 色譜儀的開(kāi)機(jī)和調(diào)試
　?。?）打開(kāi)氣體發(fā)生器，流速為30ml/min，十分鐘后排水。
　?。?）將載氣通入主機(jī)氣路，檢漏，調(diào)節(jié)載氣流速為30ml/min，通載氣半個(gè)小時(shí)將氣路中的空氣等趕走。
　?。?）打開(kāi)色譜主機(jī)電源，在控制面板上對(duì)氣化室、柱箱進(jìn)行控溫，將溫度分別調(diào)節(jié)為120℃，90℃℃；
　?。?）打開(kāi)色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)，輸入測(cè)量參數(shù)。
　　（5）FID的點(diǎn)火
　　打開(kāi)空氣開(kāi)關(guān)，調(diào)節(jié)流量為500～600ml/min，設(shè)置檢測(cè)器溫度為110℃；待檢測(cè)器溫度恒定至110℃，打開(kāi)氫氣開(kāi)關(guān)，將流量調(diào)節(jié)至80ml/min左右，點(diǎn)火，點(diǎn)燃后將氫氣流量降至20－30ml/min。
　　4.標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知試樣的分析測(cè)定
　?。?）觀察儀器譜圖基線是否平直，待儀器電路和氣路系統(tǒng)達(dá)到平衡，基線平直后，用1微升清洗過(guò)的微量注射器吸取標(biāo)準(zhǔn)試樣0.2－0.4微升進(jìn)樣，分析測(cè)定，色譜圖走完后記錄樣品名對(duì)應(yīng)的文件名，打印出色譜圖及分析測(cè)試結(jié)果。重復(fù)操作三次。記錄分析結(jié)果。
　?。?）試樣的分析  用1微升清洗過(guò)的微量注射器吸取甲苯試樣溶液0.2－0.4微升進(jìn)樣，分析測(cè)定，色譜圖走完后記錄樣品名對(duì)應(yīng)的文件名，打印出色譜圖及分析測(cè)試結(jié)果。按上述方法再進(jìn)樣分析測(cè)定兩次，記錄分析結(jié)果。
　　5.結(jié)束工作
　　 （1）實(shí)驗(yàn)完成后，清洗進(jìn)樣器。
　　（2）關(guān)機(jī)。先關(guān)氫氣閥，再關(guān)空氣閥，降低柱溫，關(guān)色譜工作站，待柱溫降至50℃再停止通載氣。
　?。?）清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，填寫(xiě)儀器使用記錄。
五、結(jié)果處理
　　1. 記錄實(shí)驗(yàn)操作條件。
　　2. 將打印出的色譜分析結(jié)果上將測(cè)量的各組分的峰高填入下表。

3．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液分析測(cè)定所得到的數(shù)據(jù)，按下式計(jì)算出甲苯的峰高校正因子（以苯為標(biāo)準(zhǔn)物）：

4．根據(jù)甲苯試樣溶液分析測(cè)定所得到的數(shù)據(jù)，按下式計(jì)算出樣品中甲苯的含量（以苯為內(nèi)標(biāo)物）：

式中，ms、m樣分別代表內(nèi)標(biāo)物苯及樣品溶液的質(zhì)量；f’甲苯（h）為苯做標(biāo)準(zhǔn)物的甲苯的峰高相對(duì)質(zhì)量校正因子。

六、注意事項(xiàng)

1.微量注射器使用前應(yīng)先用丙酮抽洗5～6次，然后再用所要吸取的試液抽洗5～6次。

2. 氫氣是一種危險(xiǎn)氣體，使用過(guò)程中一定要按要求操作，而且色譜實(shí)驗(yàn)室一定要有良好的通風(fēng)設(shè)備。

七、思考題

1. 內(nèi)標(biāo)法定量有哪些優(yōu)點(diǎn)？方法的關(guān)鍵是什么？

2. 本實(shí)驗(yàn)為什么可以采用峰高定量？