豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體試劑盒

【獸用名稱】

通 用 名  豬偽狂犬病毒阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

商 品 名  無

英 文 名    Blocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus   Antibody  

漢語拼音  Zhu WeikuangquanbingbingdugBdanbai Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要組分與含量】

【作用與用途】  用于檢測豬偽狂犬病毒抗體。

【注意事項】

（1）  試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至20～25℃，使用后放回2～8℃保存。

（2）  不同批號的試劑盒組分不得混用，不同試劑使用時應(yīng)防止交叉污染。

（3）  底物液和終止液不能暴露于強(qiáng)光或接觸氧化劑。

（4）  待檢血清數(shù)量較多時，應(yīng)先稀釋完所有待檢血清，再加到抗原包被板上，使反應(yīng)時間一致。

（5）  移液時應(yīng)盡量準(zhǔn)確，防止產(chǎn)生氣泡。

（6）  應(yīng)嚴(yán)格遵守各操作步驟規(guī)定的時間和溫度。【用法與判定】  

1  用法

1.1  樣品準(zhǔn)備  取動物全血，待血液凝固后，4000r/min離心10分鐘，收集上清?；虿杉?，待凝固后自然析出血清。血清應(yīng)清亮，無溶血。

1.2  樣品稀釋  在血清稀釋板中，用樣品稀釋液按1:1的比例稀釋待檢血清（例如：120μl樣品稀釋液中加120μl待檢血清）；陰性、陽性對照不稀釋，直接使用。

1.3  洗滌液配制20倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（20~25℃），然后用蒸餾水或純水作20倍稀釋。

1.4  操作步驟

1.4.1  取抗原包被板（根據(jù)樣本多少，可拆開分次使用），每孔加入稀釋好的洗滌液300µl，不必靜置，棄掉孔中洗滌液，洗滌2次，拍干。每孔加入稀釋好的樣本100μl；另外設(shè)陽性對照、陰性對照各2孔，100μl/孔。置37℃孵育60分鐘。

1.4.2  棄去板中液體，每孔加入稀釋好的洗滌液300µl，棄掉孔中洗滌液，重復(fù)洗滌共計洗板5次，拍干。

1.4.3  每孔加入100μl酶結(jié)合物，輕微振蕩混勻。置37℃下孵育30分鐘。

1.4.4  棄去板中液體，洗滌5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物顯色液100µl，室溫（20~25℃）避光顯色10分鐘。

1.4.6  每孔加終止液50µl。10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定并記錄各孔在630nm波長處的吸光度（OD）值。

2  判定

2.1  成立條件   陰性對照孔的OD630nm平均值與陽性對照孔OD630nm平均值之差應(yīng)≥0.6。

2.2  判定標(biāo)準(zhǔn)  S為樣品孔OD_630nm值，N為陰性對照OD_630nm平均值。如果S/N≤0.6判為陽性。如果0.6＜S/N≤0.7判為可疑。如果S/N＞0.7判為陰性。在酶標(biāo)儀上測各孔OD_630nm值，試驗成立條件是陰性對照的OD_630nm平均值≥0.6，陽性對照的OD_630nm平均值≤0.5

【規(guī)格】  96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為12個月。

僅供科研使用