重組蛋白純化的工藝創(chuàng)新方向

來源：賽爾瑞成（北京）生命科學技術(shù)有限公司 2025年07月14日 06:09

　　重組蛋白純化的工藝創(chuàng)新方向：

　　1.連續(xù)流純化技術(shù)

　　原理：將傳統(tǒng)層析步驟整合為連續(xù)流動系統(tǒng)，減少操作時間和蛋白損失。

　　案例：

　　多柱層析串聯(lián)：親和層析→離子交換→疏水層析連續(xù)處理，避免中間樣品反復凍融。

　　微流控芯片層析：利用微流體技術(shù)實現(xiàn)快速、低樣品消耗的純化。

　　2.單克隆抗體（mAb）純化創(chuàng)新

　　ProteinA親和層析優(yōu)化：

　　開發(fā)耐堿性洗滌緩沖液（如pH12~13），減少洗脫雜質(zhì)。

　　采用納米抗體或人工支架抗體（如Fc融合蛋白）提高吸附效率。

　　多模式層析（Mixed-ModeChromatography）：

　　結(jié)合離子交換和疏水作用（如CAPTO珠），一步去除多種雜質(zhì)。

　　3.重組蛋白純化膜分離技術(shù)

　　切向流過濾（TFF）：

　　用于濃縮和換液，替代傳統(tǒng)超濾，減少蛋白聚集。

　　結(jié)合深層過濾（如除病毒過濾）去除病毒和微粒。

　　膜層析（MembraneChromatography）：

　　利用功能性膜材料（如離子交換膜）直接吸附雜質(zhì)，簡化操作。

　　4.新型標簽與捕獲技術(shù)

　　自剪切標簽：

　　如intein介導的自剪切標簽（如CBD-intein），純化后無需蛋白酶切割。

　　非色譜依賴技術(shù)：

　　熱泳動（Thermophoresis）：利用溫度梯度分離蛋白與雜質(zhì)。

　　等電點沉淀：通過調(diào)節(jié)pH使雜質(zhì)沉淀，保留目標蛋白。

　　5.人工智能驅(qū)動工藝優(yōu)化

　　數(shù)據(jù)驅(qū)動設(shè)計：

　　利用機器學習預測層析參數(shù)（如pH、鹽濃度）對雜質(zhì)去除的影響。

　　優(yōu)化緩沖液配方，減少離子強度或添加劑（如チャァ」剤）的使用。

　　在線監(jiān)測技術(shù)：

　　實時監(jiān)測紫外吸收（A280）、熒光或拉曼光譜，動態(tài)調(diào)整純化條件。

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