CF488A Tyramide 是一種綠色熒光探針，由熒光基團(tuán)CF488A與酪胺基團(tuán)通過(guò)酰胺鍵連接而成。

熒光基團(tuán)（CF488A）：屬于熒光素衍生物，具有較高的亮度和光穩(wěn)定性。

酪胺基團(tuán)：含有苯環(huán)羥基（-OH）和乙氨基（-NH?），在辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化下可被氧化為自由基，并與目標(biāo)蛋白附近的酪氨酸殘基共價(jià)結(jié)合。

免疫熒光：用于免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）、免疫組織化學(xué)（IHC）或原位雜交（ISH）中的信號(hào)放大。

低豐度靶標(biāo)檢測(cè)：特別適用于檢測(cè)低豐度的蛋白質(zhì)或核酸。

多色成像：支持多重檢測(cè)，可在同一樣本上標(biāo)記多個(gè)目標(biāo)。

作用機(jī)制：

CF488A Tyramide 通過(guò)酪胺信號(hào)放大技術(shù)（TSA）實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大，靈敏度可達(dá)傳統(tǒng)方法的100倍。

1.HRP催化激活：辣根過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫產(chǎn)生氧自由基，使酪胺基團(tuán)氧化為高活性自由基中間體。

2.共價(jià)結(jié)合靶點(diǎn)：激活的酪胺自由基與目標(biāo)蛋白/核酸附近的酪氨酸殘基共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的標(biāo)記。

3.熒光信號(hào)沉積：每個(gè)HRP分子可在局部催化沉積大量CF488A酪胺分子，實(shí)現(xiàn)熒光信號(hào)的空間集中放大。

基礎(chǔ)知識(shí)概述:  

中文名：CF488A Tyramide

英文名：CF488A Tyramide

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg、10mg

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

使用方法：

1.樣品前處理：

固定：4%多聚甲醛/PBS，15分鐘。

透化：0.1–0.5% Triton X-100/PBS，5–10分鐘。

封閉：5% BSA或正常血清，30分鐘。

2.一抗孵育：

按說(shuō)明書(shū)稀釋一抗，覆蓋樣品，濕盒避光孵育。

3.HRP-二抗結(jié)合：

洗滌后加入HRP標(biāo)記二抗，室溫孵育30–60分鐘。

4.酪胺工作液配置與反應(yīng)：

用含0.003% HO的擴(kuò)增緩沖液稀釋CF488A Tyramide（200–1000倍），每樣品加100μL，室溫避光孵育5–10分鐘。

注意：超時(shí)孵育易導(dǎo)致背景升高，需預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化濃度。

5.終止與復(fù)染：

PBS沖洗3次，每次5分鐘。

核復(fù)染：推薦DAPI（Ex/Em=358/461nm）或Hoechst。

包裝：  

質(zhì)量控制：95%+