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BD 流式細胞儀是集激光技術、電子物理、光電測量、計算機及細胞熒光化學技術于一體的多參數(shù)細胞分析儀器，廣泛應用于生命科學研究和臨床診斷領域。其核心功能是通過液流系統(tǒng)將細胞或微粒排列成單列，依次通過激光束檢測點，利用光學系統(tǒng)激發(fā)熒光標記物并捕獲散射光與熒光信號，最終通過電子系統(tǒng)將光信號轉換為數(shù)字信號進行多維度分析。
其液流系統(tǒng)由鞘液管、樣品管和噴嘴組成，通過流體動力學聚焦使細胞懸浮液形成直徑約3-10μm的穩(wěn)定液柱，確保每個細胞獨立通過激光檢測區(qū)。光學系統(tǒng)采用氬離子激光器（488nm）或氪離子激光器（647nm），激發(fā)細胞表面或內部的熒光染料（如FITC、PE）。前向散射光（FSC）反映細胞體積，側向散射光（SSC）揭示胞內顆粒結構，而熒光信號強度則對應標記抗原或核酸的濃度。光電倍增管（PMT）將光信號轉換為電脈沖，經模數(shù)轉換后生成FCS格式數(shù)據文件。
BD 流式細胞儀的技術特點：
1、高通量檢測
高速分析：檢測速度可達每秒數(shù)千至上萬個細胞，適用于大規(guī)模樣本篩查（如血液免疫細胞分析、腫瘤細胞分型）。
高效數(shù)據處理：支持短時間內處理大量細胞（如百萬級細胞），滿足臨床診斷和藥物篩選的需求。
2、多參數(shù)同步分析
多色熒光檢測：配備多波長激光（如488nm、633nm等）和多通道熒光檢測器，可同時檢測3~30+種熒光標記參數(shù)（如FITC、PE、APC等），結合散射光參數(shù)（FSC/SSC），實現(xiàn)單細胞層面的多維特征分析。
信息維度豐富：可同步檢測細胞表面抗原、胞內細胞因子、DNA含量、活性氧（ROS）等指標，揭示細胞功能與狀態(tài)的關聯(lián)性。
3、單細胞分辨率
個體化分析：以單細胞為檢測單位，直接反映細胞間的異質性，避免群體平均化掩蓋關鍵信息（如腫瘤細胞的異質性、干細胞分化狀態(tài)）。
稀有細胞檢測：可捕捉極低含量的稀有細胞（如循環(huán)腫瘤細胞CTCs，含量低至1個/10^6個血細胞）。
4、定量分析精準
熒光校準與絕對計數(shù)：通過標準微球建立熒光定量曲線，結合已知濃度的計數(shù)微球，實現(xiàn)絕對定量分析（如HIV患者CD4+T細胞絕對計數(shù)）。
數(shù)據標準化：確保不同實驗批次間數(shù)據的可比性，適用于科研和臨床診斷。
5、動態(tài)檢測能力
實時追蹤細胞狀態(tài)：結合實時信號采集系統(tǒng)，可監(jiān)測細胞在藥物、細胞因子等刺激下的動態(tài)響應（如鈣流變化、膜電位波動）。
動力學研究：適用于研究細胞信號傳導通路（如T細胞受體激活后的Ca²+瞬時升高）或納米顆粒與細胞的相互作用。
6、細胞分選功能
高純度分選：通過電荷偏轉技術，對目標細胞施加電荷，使其偏離主液流進入收集管，分選純度可達95%以上。
應用場景：
基礎研究：分選特定干細胞（如CD34+造血干細胞）用于體外培養(yǎng)或移植研究。
臨床應用：分選腫瘤細胞用于單細胞測序，解析基因突變譜。
7、非侵入性檢測
樣本適用性廣：可直接檢測新鮮組織懸液、血液、體液、培養(yǎng)細胞等，無需復雜預處理（如切片染色）。
活細胞檢測：支持活細胞檢測（如細胞活性染料PI/Calcein-AM染色），保留細胞功能完整性，適用于干細胞研究。
8、自動化與標準化
智能操作：現(xiàn)代流式細胞儀配備自動化軟件（如FlowJo、Cytobank），支持一鍵式數(shù)據采集、分析及報告生成。
降低人為誤差：標準化操作流程（如QC微球校準光路）提升實驗重復性，適合大規(guī)模臨床實驗室使用。
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