蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics）是后基因組時代的重要研究領(lǐng)域，旨在全面研究生物體內(nèi)所有蛋白質(zhì)的表達(dá)、結(jié)構(gòu)、功能、修飾及其相互作用。它不僅是基因組學(xué)的補充，更是理解生命活動分子機(jī)制的核心手段，它是一種基于質(zhì)譜檢測的分析技術(shù)。

該方法的大致過程是將從樣本中提取到的蛋白水解/酶解為肽段，然后進(jìn)行質(zhì)譜檢測，根據(jù)肽段的鑒定和定量信息推測出其對應(yīng)蛋白的鑒定和定量結(jié)果。因此，目前的蛋白質(zhì)組學(xué)樣品制備流程，通常均會包括蛋白提取、蛋白酶解和肽段除鹽三個步驟。

一、蛋白提取

蛋白質(zhì)提取旨在從含多種干擾物的生物樣本中釋放并純化蛋白質(zhì)。通過裂解液（含SDS、尿素等去垢劑）破壞樣本結(jié)構(gòu)，結(jié)合超聲/研磨促進(jìn)蛋白溶解。針對雜質(zhì)或SDS干擾，可采用沉淀/復(fù)溶等方法純化。血漿需去除高豐度蛋白以提高檢測靈敏度。提取方法需適配后續(xù)分析需求。

二、蛋白酶解

蛋白質(zhì)是一類含有空間結(jié)構(gòu)的高分子化合物，在酶解前需要提前加入還原劑提高酶解效率。蛋白質(zhì)組學(xué)中常用胰蛋白酶進(jìn)行酶解處理，將蛋白酶解為適宜質(zhì)譜檢測的肽段長度。

三、肽段除鹽

蛋白樣本前處理通常是在含鹽緩沖體系中進(jìn)行，目前常使用層析法，主要原理是SDB或C18材質(zhì)的層析柱可以結(jié)合待檢測肽段，從而達(dá)到分離和純化肽段的目的。脫鹽后的肽段通過真空離心濃縮儀抽干后，即可于4℃或-20℃短期保存，等待后續(xù)的質(zhì)譜檢測。

如何建立一個高效的樣品制備流程？

在蛋白提取和酶解階段，越來越多的公司采用一體式自動化前處理儀器。如北京青蓮百奧生物有限公司生產(chǎn)的前處理機(jī)器人，可同時處理1-96個樣本。酶解后的樣品放入離心濃縮儀干燥后進(jìn)質(zhì)譜檢測。離心濃縮儀以其高通量、快速、避免交叉污染等優(yōu)勢，迅速成為蛋白質(zhì)組學(xué)測試中的必bei 儀器。

濃縮儀的選擇

北京吉艾姆儀器有限公司作為國產(chǎn)離心濃縮儀行業(yè)先鋒，打破國外濃縮儀壟斷局面，產(chǎn)品性能達(dá)到國際水平。吉艾姆作為青蓮百奧長期友好合作伙伴，其CV200離心濃縮儀和CV600冷凍離心濃縮儀已服務(wù)多年。以其穩(wěn)定的性能和專業(yè)周到的售后部門，受到客戶的信賴。

試用評價：

青蓮百奧作為蛋白組學(xué)方向試用者，使用3周后給出以下使用評價：

1) 干燥時間縮短一倍以上；

2) 一體機(jī)占臺面小，液晶屏操作簡單；

3)保存?zhèn)€性濃縮方案，可一鍵啟動

金剛1000系列溶劑蒸發(fā)工作站的特點：

• 內(nèi)置雙高功率紅外燈，加快濃縮速率

• 一體式機(jī)型，占地面積小

• 樣品防護(hù)：防暴沸技術(shù)協(xié)同非接觸式控溫，防止樣品暴沸及過熱分解

• 高通量：多樣本平行處理

• 高效去除DMF和DMSO等高沸點溶劑

• 智能化蒸發(fā)系統(tǒng)：一鍵啟動，數(shù)據(jù)全過程記錄。

• 樣品回收率高達(dá)95%以上

• 適用于組學(xué)研究、藥物化學(xué)、天然產(chǎn)物發(fā)現(xiàn)、分析及檢測等樣品前處理需要

未來，吉艾姆公司將深入踐行“持續(xù)創(chuàng)新、提升服務(wù)理念”奮力成為具有國際競爭力的真空濃縮儀設(shè)備制造供應(yīng)商。