楊氏檸檬酸桿菌是Citrobacter屬的微生物，原產(chǎn)地為美國。

一、菌種簡介

平臺編號：bio-85060

提供形式：凍干物

拉丁屬名：Citrobacter youngae

中文名稱：楊氏檸檬酸桿菌

拉丁名稱：Citrobacter youngae

其它保藏中心編號：=DSM 17578=ATCC 29935=CDC 460-61=CECT 5335=CIP 105016

來源歷史：←DSMZ←CIP

收藏時間：2016/6/15

原始編號：460-61

原產(chǎn)國：美國

模式菌株：非模式菌株

主要用途：分類；研究

特征特性：雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基中44.5℃培養(yǎng)不生長。在伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基上的菌落呈白色至淺粉色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤。DNA雜交參照菌株。

具體用途：分類學研究。

生物危害程度：四類

培養(yǎng)基編號：CM0847

培養(yǎng)基名稱：胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA）(CAIQ0701)

培養(yǎng)基成分：胰蛋白胨 15.0g，大豆胨 5.0g，氯化鈉 5.0g，瓊脂 13.0 g，蒸餾水 1.0L，pH7.3±0.2。

培養(yǎng)溫度：30℃

需氧類型：好氧

分離基物：肉渣

采集地：美國南加利福尼亞

保存方法：-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享

用途：分類學研究。

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

二、形態(tài)特征

雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基中44.5℃培養(yǎng)不生長。在伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基上的菌落呈白色至淺粉色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤。DNA雜交參照菌株。

三、主要價值

主要用途為分類；研究，具體用途為分類學研究。

四、楊氏檸檬酸桿菌冷凍干燥保藏轉(zhuǎn)接技術(shù)

建議用下列方法恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏的菌種。

1、安瓶管開封

用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。

用火焰將安瓿管頂端加熱。

滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。

用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)

用無菌吸管，吸取0.3-0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴人安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀

取0.1-0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養(yǎng)基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi)，然后在建議的溫度下培養(yǎng)。  

3、注意事項

菌種活化前，請將安瓿管保存在6一10℃的環(huán)境下。

厭氧菌的培養(yǎng)，如無特別說明，自開封至接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)。

某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,此時請將步驟二重復(fù)一次。

五、楊氏檸檬酸桿菌轉(zhuǎn)接方法

真菌轉(zhuǎn)接需使用的接種工具為接種鉤、鏟，其樣式大小見圖1。制造的金屬可用鉑絲或鎳絲，也可使用電爐絲，原則是軟硬度適當，能經(jīng)受反復(fù)火焰燒紅。接種真菌的接種鉤、鏟，其絲的直徑以1毫米比較適合。

操作步驟：1、右手執(zhí)針（鏟、鉤等），左手執(zhí)管，燒針滅菌，拔塞燒口，挑菌移植，燒口塞管，燒針滅菌等。

2、右手執(zhí)接種鉤、鏟，使前端細絲的部位全部在火焰上燒紅殺菌，左手執(zhí)斜面試管，試管口在拔塞前快速通過火焰，不要使試管口過熱；

3、接種鉤、鏟前端細絲的部位全部燒紅后插入70%無菌酒精里，拿出再燒紅，空氣中自然冷卻或放入70%無菌酒精瓶內(nèi)冷卻，再將接種鉤、鏟前端細絲的部位快速通過火焰除去酒精；

4、用接種接種鉤、鏟挑取菌塊移植到新的斜面培養(yǎng)基上（斜面試管管口滅菌）后；

5、試管口和塞子快速通過火焰滅菌，不要使試管口過熱或使棉塞著火；

6、斜面試管口塞緊硅膠塞或棉塞，將接種鉤、鏟接觸真菌的部位燒紅后放入70%無菌酒精瓶中；

7、接種后的試管放25℃（無特殊溫度要求的真菌）培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

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