1、現(xiàn)行的沉降菌和浮游菌除了采樣方法不同，其他意義何在？

答：沉降菌和浮游菌都是空氣微生物，但是它們代表的意義不同，沉降菌是沒有辦法時候的選擇，就等于說你沒有相關(guān)的儀器設(shè)備，你只能用沉降菌的方法來做，但是沉降菌只是大顆粒，容易掉下來的，不能代表真實的空氣中微生物的數(shù)量，而浮游菌相對來說是更能直接表達(dá)空氣的衛(wèi)生污染程度的，它們兩個是不太一樣的。

2、老師購買的一次性帶包裝的培養(yǎng)皿可以在無菌室或培養(yǎng)室暫存嗎？

答：如果你買的商品化的培養(yǎng)基帶包裝的培養(yǎng)皿，可以放在無菌室暫存，但是這個保存期就要縮短。一般來說，商品化的一次性培養(yǎng)基都是需要避光冷藏保存的，在避光冷藏保存下，一般規(guī)定了保質(zhì)期。但是你如果放在無菌室，短時間可以，但是它的保存期就難以估計了，另外還有光，光照對培養(yǎng)基也是有影響的。你可以暫存，暫存是可以的。

3、如果在無菌室外暫存進(jìn)無菌室還需要通過傳遞窗紫外殺菌嗎？

答：一般不需要，因為是這樣，培養(yǎng)基是包裝好的，進(jìn)了無菌室直接把包裝拆掉，它外包裝上的污染就沒有了。通過傳遞窗紫外燈殺菌，紫外線只能照到上面，又不能穿透，又不能拐彎，所以紫外燈的殺菌范圍、面積都是很有限的，并不能真正解決外包裝物上面有污染這個問題。

4、車間和無菌室的環(huán)境采樣多長時間測一次？

答：GB/T 27405-2008有規(guī)定，27405的附錄是規(guī)定無菌室每兩周做一次，有標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。

5、生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控中，涂抹手，設(shè)備表面地面墻面等的面積，方法，以及判定標(biāo)準(zhǔn)？

答：生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控一般來說是按照GB 14881-2013這個標(biāo)準(zhǔn)的系列——良好生產(chǎn)工藝規(guī)范來規(guī)定。但不是每一種食品類別的生產(chǎn)環(huán)境都是有明確規(guī)定的，像包裝飲用水GB 19306-2018就有明確規(guī)定的，每只手該怎么樣等都是有規(guī)定的，但是多數(shù)類別是沒有標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的，因為不同的商品生產(chǎn)是有不同的面積要求限值的，這個沒法一刀切。

6、老師聽過上次您有關(guān)沉降菌的課，有個疑惑GB 50591-2010里面培養(yǎng)皿放置在地面及其以上0.8m之內(nèi)的任意高度，16294的0.8-1.5m哪個檢測出來的結(jié)果更具有說服力？

答：關(guān)于沉降菌，我們檢查的是你正常操作的高度上到底有沒有微生物污染。所以，如果你操作臺面是0.8m高度或者包裝飲用水灌裝是1.5m高度，那你覺得在生產(chǎn)線的哪個地方哪個高度需要檢微生物？我覺得目前沒有一個生產(chǎn)企業(yè)是需要檢地面上的，培養(yǎng)皿放地面上暴露，在地面上的高度沒有人在這位置進(jìn)行生產(chǎn)操作的，所以這個位置的微生物污染對我們是可以忽視的。因為層流送風(fēng)一般是從上往下吹，那么吹到地面上是最臟的時候，你檢那個地方有什么意思呢？沒有任何意義，我們只要檢我們的正常操作高度，就是正常高度0.8-1.5m之間哪個位置有用，當(dāng)然你說你在2m的高度操作也可以，或者你說我在0.5m的高度操作，這個也是允許的，但是你在地面上檢驗，沒有什么說服力，我覺得基本上沒有需求。

7、老師好，有沒有環(huán)境存在新冠病毒檢測方面的研究，我們正在做疫情防控，想了解一下，我們的門把手、桌面是否含有新冠病毒，含有的可能性多大？謝謝。防控工作中我們負(fù)責(zé)采集樣本。

答：講課的時候講到過，北京疾控昨天還是前天公布的就是他們做了門把手等，都沒有新冠病毒，做了很多份，所以一般來說你不需要在做了。即使有這個病毒，有患者接觸過這個門把手，過一會這個病毒也是死掉了，你檢出來的新冠病毒核酸也不是活的病毒，沒有什么感染性。那如果說你一定要檢，你可以按照衛(wèi)生部的新冠病毒防控手冊第七版看看。

8、氮?dú)?，無菌氣，如何取樣？

答：你可以把氮?dú)饨觽€管子通到采樣器上，或者把氮?dú)庵苯訉χ瞻椎?/span>TSA瓊脂平板直接吹，就讓它撞擊撞到瓊脂表面上去。同樣的，你需要選擇一個定量的流量（升）或者說是每立方米數(shù)，吹了一立方米，然后你再培養(yǎng)來計數(shù)這個樣品。

9、員工手部和工器具設(shè)備檢測有標(biāo)準(zhǔn)嗎？

答：有的，員工手部和工器具設(shè)備檢驗，最直接的標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)是衛(wèi)生部的《消毒技術(shù)規(guī)范》。

10、兩蟲檢測需要哪些設(shè)備設(shè)施

答：兩蟲檢測有半自動的和全自動的，包括了富集裝置濃縮和檢測系統(tǒng)，全自動的價格在一百萬左右波動，不建議買，半自動的是10幾萬到30幾萬之間吧。

11、老師，請問一下生活飲用水做微生物如果超過4h檢測，或者隔天檢測，是不是時間越長會導(dǎo)致一部分微生物死亡而不是增長呢？

答：不好說，生活飲用水如果你放了超過4 h檢測或者隔天檢測，不能確定微生物就是死亡還是繁殖了，比如說生活用水中有銅綠假單胞菌，這種菌能夠利用很少很少，哪怕塑料包裝瓶上一點(diǎn)點(diǎn)塑料的溶出物，都可以繁殖，所以說隔天有可能綠膿會越長越多。

12、霉菌培養(yǎng)箱的霉菌怎么處理？

答：平時的就是先噴一些酒精殺菌，然后揮發(fā)干了以后你測一下，如果還是不行的話，培養(yǎng)箱里面如果有電源插座的話，也可以加一盞紫外燈。在里面，它會產(chǎn)生一些臭氧，也能夠殺死一些表面的微生物。如果嚴(yán)重污染的情況，建議用甲醛熏蒸，甲醛對培養(yǎng)箱沒有任何的腐蝕作用，反正悶在里面。使用乳酸、二氧化硫之類，對設(shè)備腐蝕性太強(qiáng)。

13、拌面醬微生物檢測前是否需要進(jìn)行前處理，因為含有液態(tài)食用植物油的情況，是否需要用石蠟進(jìn)行預(yù)處理呢？

答：感覺你這個是復(fù)合調(diào)味料，我覺得你不要加液體石蠟，而是應(yīng)該加吐溫80，加吐溫80然后全部去均質(zhì)，因為吐溫80能讓植物油乳化，就像做奶油檢驗一樣。如果你覺得目前沒法想象具體如何操作，就可以參照GB 4789.18-2010奶油的檢驗方法，按照奶油的方法來做，沒問題。

14、老師上次講沉降菌，采樣后由于運(yùn)輸時間長，放在當(dāng)?shù)仄渌麑嶒炇依锱囵B(yǎng)，請問這樣處理的話儀器質(zhì)量控制方面怎么寫？

答：儀器質(zhì)量控制記錄為當(dāng)?shù)氐呐囵B(yǎng)箱。因為我們在當(dāng)?shù)氐募部刂行牡膶嶒炇乙彩峭ㄟ^實驗室資質(zhì)認(rèn)定的，也是通過國家實驗室認(rèn)可的，這樣的情況就相當(dāng)于我們租用他們的實驗室儀器設(shè)備，把合同寫清楚就好了。他們肯定有相應(yīng)的質(zhì)量控制，我們只要能夠保證溯源，能夠查到就可以了。

15、加標(biāo)一般理化會這樣執(zhí)行，微生物一般一次做完可以這樣理解嗎？

答：你就是平行采兩份，看它們之間的偏差，比如說我到現(xiàn)場采了兩份生活用水，一份作為檢驗樣，一份作為平行樣，如果兩份樣品數(shù)值差了很多就不對了。但是，具體差多少算為不合格，那要實驗室自己定，只是說現(xiàn)在這個標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定你要這么做，只是沒有說要怎么判定。理化有規(guī)定偏差多少以上判定不合格，但是微生物沒有具體的規(guī)定，要怎么判定還是要實驗室自己規(guī)定。

16、請問老師：1）關(guān)于生產(chǎn)車間表面微生物取樣和檢測的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)都有哪些？2）對于車間地面采樣點(diǎn)如何布置，最少需要幾個取樣點(diǎn)？3）如需要檢測致病菌（如沙門氏菌），取樣點(diǎn)和取樣量該怎么布置？

答：1）生產(chǎn)車間的表面取樣按照GB 14881系列標(biāo)準(zhǔn)食品生產(chǎn)衛(wèi)生規(guī)范。有的標(biāo)準(zhǔn)GB 19306 包裝飲用水的是有明確規(guī)定的，大多數(shù)的產(chǎn)品沒有具體規(guī)定，不同的食品種類是不一樣的，具體的還要等修訂。2）不要做地面，因為沒人在地面上做生產(chǎn)，只需要做0.8-1.5 m的操作面積高度上。標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的很明確，可以自己定。3）一般生產(chǎn)車間表面是不需要檢沙門氏菌的，應(yīng)該檢驗簡單的常規(guī)指示菌如菌落總數(shù)或者大腸菌群或者腸桿菌科就可以了。如果沒有大腸桿菌或者說腸桿菌科，沙門氏菌也不可能存在的。單純的檢一個目標(biāo)菌意義不大，你也不能保證其他的致病菌就不存在。

17、老師，硫代硫酸鈉可以采完樣后再添加呢？

答：必須是采樣完再添加。只有知道現(xiàn)場檢測后才知道是否有余氯，才能添加。不能高壓滅菌前添加在采樣容器里面。

18、皿為單位是多長時間？

答：要根據(jù)具體執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)。有的五分鐘，有的半小時，有的四小時，甚至有的可以連續(xù)暴露過夜。

19、老師，請問一下，做空氣微生物，如果平板都是沒有長菌，結(jié)果應(yīng)該報0，小于1還是未檢出呢？

答：都可以，空氣微生物的檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)都比較粗，并沒有規(guī)定怎么報告。一般都需要實驗室自行規(guī)定，建立自己實驗室的作業(yè)指導(dǎo)書。

20、那平板平均值如果是0.8，那結(jié)果報多少？可以直接寫0.8還是1？

答：不好說，自己規(guī)定。還是需要實驗室有作業(yè)指導(dǎo)書來統(tǒng)一規(guī)定怎么做。但是需要注意避免因為修約把0.8變成1導(dǎo)致判定為不合格的情況——國外機(jī)構(gòu)要求百級潔凈度都是＜1，我國可能是允許≤1。這時候，明明是0.8判為合格，被你修約后報告1，可能就變成不合格結(jié)果了。

21、搭皿蓋這樣是錯誤的，那怎樣是對的？

答：建議聽上一期的GB/T 16294的課程。的辦法是帶一些滅菌的報紙去現(xiàn)場，鋪在桌面上，把平皿放在上面，平皿蓋也直接放在上面，沒有污染的問題，而且報紙可以防止桌面上的灰塵飄起來到平皿里。

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