常見問題

異硫氰酸熒光素和異硫氰酸熒光素酯在標(biāo)記細(xì)菌上的區(qū)別是什么

2025-03-01

索萊寶助手

您好，異硫氰酸熒光素（FITC）和異硫氰酸熒光素酯在標(biāo)記細(xì)菌上有以下一些區(qū)別：1. 化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)，F(xiàn)ITC：具有相對較小的分子結(jié)構(gòu)，含有異硫氰酸基，能與生物分子中的氨基等基團(tuán)發(fā)生特異性反應(yīng)，在堿性條件下，異硫氰酸基可與細(xì)菌表面的氨基形成穩(wěn)定的硫脲鍵，從而實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌的標(biāo)記。它的水溶性較好，能在水溶液中穩(wěn)定存在，有利于在生物體系中的應(yīng)用。異硫氰酸熒光素酯：通常是 FITC 的酯類衍生物，其分子結(jié)構(gòu)中酯基的存在使其化學(xué)性質(zhì)與 FITC 有所不同。酯基在某些條件下可發(fā)生水解反應(yīng)，生成相應(yīng)的酸和醇。在標(biāo)記細(xì)菌時(shí)，酯基可能需要先經(jīng)過水解等過程，釋放出具有活性的異硫氰酸熒光素部分，才能與細(xì)菌表面的基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)。其水溶性一般較 FITC 差，可能需要使用有機(jī)溶劑助溶，但在一些非水相或疏水性環(huán)境中可能具有更好的溶解性和穩(wěn)定性。2. 標(biāo)記反應(yīng)條件，F(xiàn)ITC：標(biāo)記細(xì)菌時(shí)，通常在溫和的堿性條件下進(jìn)行，例如 pH 值在 7 - 9 之間。反應(yīng)溫度一般在 4 - 37℃，反應(yīng)時(shí)間根據(jù)具體細(xì)菌種類和實(shí)驗(yàn)要求有所不同，一般在 30 分鐘至數(shù)小時(shí)不等。由于 FITC 水溶性好，可直接溶解在緩沖液中與細(xì)菌混合進(jìn)行標(biāo)記，操作相對簡便。異硫氰酸熒光素酯：由于其酯基的存在，標(biāo)記反應(yīng)可能需要更復(fù)雜的條件。在一些情況下，需要先將其溶解在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中，然后再加入到含有細(xì)菌的緩沖液中。同時(shí)，可能需要考慮酯基水解的條件，例如加入適量的酯酶或控制反應(yīng)體系的 pH 值和溫度，以促進(jìn)酯基水解并使釋放出的 FITC 與細(xì)菌發(fā)生標(biāo)記反應(yīng)。反應(yīng)條件的優(yōu)化可能更為關(guān)鍵，以確保酯基能夠有效地水解并實(shí)現(xiàn)高效的細(xì)菌標(biāo)記。3. 標(biāo)記效果與應(yīng)用，F(xiàn)ITC：標(biāo)記細(xì)菌后，由于其分子結(jié)構(gòu)相對較小，能夠較為均勻地分布在細(xì)菌表面，對細(xì)菌的生理功能和形態(tài)影響較小。標(biāo)記后的熒光信號穩(wěn)定，熒光強(qiáng)度較高，有利于通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等設(shè)備進(jìn)行檢測和分析。廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的定位、計(jì)數(shù)、動態(tài)監(jiān)測以及細(xì)菌與其他生物分子相互作用等研究領(lǐng)域。異硫氰酸熒光素酯：標(biāo)記細(xì)菌后，其熒光性質(zhì)與 FITC 類似，但由于酯基水解過程的存在，可能在標(biāo)記效率和熒光信號的穩(wěn)定性方面與 FITC 有所差異。在某些特定的應(yīng)用中，例如研究細(xì)菌在疏水性環(huán)境中的行為或與脂質(zhì)體等疏水性物質(zhì)的相互作用時(shí)，異硫氰酸熒光素酯可能有優(yōu)勢。此外，由于其化學(xué)性質(zhì)的差異，在一些需要對標(biāo)記過程進(jìn)行特殊控制或?qū)?biāo)記產(chǎn)物進(jìn)行特定修飾的實(shí)驗(yàn)中，也可能會選擇異硫氰酸熒光素酯。

常見問題

溶解后可以保存多長時(shí)間

2025-01-09

索萊寶助手

您好，如果是溶于有機(jī)溶劑配置成高濃度儲備液，置于-20℃避光保存通?？梢员４嬷辽?個(gè)月，如果是工作濃度，一般置于4℃避光可以保存2-3天。

常見問題

請問FITC的激發(fā)波長和發(fā)射波長是多少？

2025-01-07

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC的激發(fā)波長通常在488nm左右，發(fā)射波長通常在520nm左右

常見問題

請問FITC可以標(biāo)記RNA嗎

2024-09-21

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC（異硫氰酸熒光素）可以標(biāo)記 RNA，其標(biāo)記原理基于 FITC 的異硫氰酸酯基團(tuán)（-N=C=S）與 RNA 分子中的氨基（-NH?）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的硫脲鍵。不過，天然 RNA 分子通常不含游離氨基，因此需要通過以下方法對 RNA 進(jìn)行預(yù)處理，引入氨基后再與 FITC 偶聯(lián)。

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請問FITC可以用于標(biāo)記細(xì)菌么

2024-08-09

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC（異硫氰酸熒光素）可以用于標(biāo)記細(xì)菌，其原理是通過化學(xué)反應(yīng)與細(xì)菌表面或內(nèi)部的氨基（-NH?）結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記。

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F8070 可以染細(xì)菌嗎

2024-07-04

索萊寶助手

您好，可以的

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請問FITC溶于水嗎?

2023-10-27

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC是微溶于水，推薦用無水乙醇或DMSO溶解。

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dmso需要稀釋嗎?

2023-10-26

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC可以直接用DMSO溶解。

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你好請問FITC溶于超純水嗎?

2023-10-23

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC微溶于水，推薦用無水乙醇或DMSO溶解。

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可以標(biāo)記小鼠體內(nèi)右旋糖嗎?

2023-09-19

索萊寶助手

您好，通常是標(biāo)記蛋白的，沒有做過糖類的標(biāo)記檢測。

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請問這個(gè)如何配置使用，謝謝?

2023-07-17

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC可以溶于DMSO。

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請問這款可以標(biāo)記藥物材料拍攝共聚焦CLSM圖像嗎?

2023-06-18

索萊寶助手

您好，該熒光染料可以用于激光共聚焦。

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FITC熒光染料可以染聚谷氨酸鈉嗎?

2023-05-22

索萊寶助手

您好，主要是標(biāo)記各組抗體蛋白，不能用于在含諸如 Tris 或甘氨酸等胺的緩沖液中制備的蛋白，因?yàn)樗鼈円种屏藰?biāo)記反應(yīng)，并在堿性溶液中仍有強(qiáng)烈綠色熒光，加酸后析出沉淀，熒光消失，微溶于丙酮、石油醚。

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你好這個(gè)熒光標(biāo)記物可標(biāo)記膠原蛋白嗎?

2023-02-15

索萊寶助手

您好，原理上FITC可以標(biāo)記膠原蛋白。

常見問題

你們家有可以標(biāo)記細(xì)胞膜的物質(zhì)嗎?

2022-11-11

索萊寶助手

您好，DiI、DiO、DiD、DiR染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。

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您好 請問 近紅外熒光染料 是能夠發(fā)出近紅外光的嗎?

2022-10-26

索萊寶助手

您好，該染料主要用于熒光抗體技術(shù)中的一類綠色熒光染料。

常見問題

激發(fā)波長和發(fā)射波長多少?

2022-10-26

索萊寶助手

您好，最大激發(fā)波長為 495 nm；最大發(fā)射波長為 525 nm。

常見問題

這個(gè)熒光染料可以用DMSO配置后，放在4℃冰箱長期保存嗎?

2022-10-23

索萊寶助手

您好，溶解后的試劑建議分裝儲存于-20℃進(jìn)行保存。

常見問題

請問FITC能標(biāo)記細(xì)菌嗎?

2022-08-05

索萊寶助手

您好，F(xiàn)ITC等這類熒光染料目前標(biāo)記蛋白類尤其是抗體等有比較成熟的實(shí)驗(yàn)方案，細(xì)菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)對熒光染料進(jìn)入會有阻礙作用，如果實(shí)驗(yàn)涉及到這一方面需要進(jìn)一步查閱相關(guān)文獻(xiàn)。