實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，大多數(shù)細(xì)胞的凍存遵循“慢速凍存”的原則，通過(guò)程序降溫盒或程序化冷凍儀，控制降溫速率（通常為1°C/min），使細(xì)胞在冷凍過(guò)程中逐步脫水，避免細(xì)胞內(nèi)結(jié)冰。該方法顯著提高了凍存細(xì)胞的存活率。

研究表明5%-10%的DMSO*適合細(xì)胞凍存，具體比例要根據(jù)細(xì)胞種類調(diào)整，對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞則需要降低比例。根據(jù)小尚的經(jīng)驗(yàn)，8% DMSO適用于大部分細(xì)胞系。同時(shí)，還需根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)難度調(diào)整血清比例，越難養(yǎng)的細(xì)胞越要多加血清，過(guò)于脆弱的細(xì)胞可用血清+DMSO凍存，不加培養(yǎng)基。我們常用的凍存液配方是92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦)。

尚恩生物提供的特級(jí)胎牛血清呈淺黃色澄清、無(wú)溶血溶液，經(jīng)各項(xiàng)檢測(cè)確認(rèn)無(wú)菌、無(wú)支原體、無(wú)噬菌體及相關(guān)牛源病毒，低內(nèi)毒素（＜3EU/mL），不含外源激素、生長(zhǎng)因子、抗生素等。細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試效果良好，細(xì)胞生長(zhǎng)速度、形態(tài)均正常，可用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞、原代細(xì)胞以及大部分干細(xì)胞。

尚恩非程序性細(xì)胞凍存液（無(wú)血清）是一種不含血清且不需要經(jīng)過(guò)程序降溫步驟的凍存液，可以重懸細(xì)胞后直接置于超低溫冰箱而無(wú)需逐步降溫或者程序性凍存盒，極大方便了細(xì)胞凍存操作，同時(shí)減少了血清對(duì)細(xì)胞 及實(shí)驗(yàn)的影響。

無(wú)論用何種凍存液，都建議做凍檢再正式凍存：即凍存24h后復(fù)蘇一支，確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)沒(méi)問(wèn)題，即可進(jìn)行大批量?jī)龃妗鰴z成功前要留至少一瓶細(xì)胞培養(yǎng)，以免復(fù)蘇失敗導(dǎo)致細(xì)胞絕種。