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ATP酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)介紹

來源:上海信帆生物科技有限公司   2025年07月28日 09:50  

ATP酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)介紹

服務(wù)介紹:三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸,并放出能量。磷酸和鈉離子結(jié)合,在酶活性處形成無色的磷酸鈣,磷酸鈣經(jīng)氯化鈷處理形成磷酸鈷,再經(jīng)硫化銨處理形成棕黑色的硫化鈷沉淀在酶活性部位。經(jīng)酸預(yù)孵后,Ⅱ型纖維 ATP 酶活性被抑制,Ⅰ型纖維卻保持著 ATP 酶活性,所以被染成了黑色或深褐色。

實(shí)驗(yàn)原理:ATP酶是肌肉纖維內(nèi)的一種酶,其活性與肌肉纖維類型密切相關(guān)。在ATP酶染色實(shí)驗(yàn)中,切片首先經(jīng)過一系列預(yù)處理步驟,然后置于ATP酶染液中。ATP酶會將染液中的底物ATP水解,產(chǎn)生顏色反應(yīng)。由于不同類型的肌肉纖維ATP酶活性差異較大,因此在染色后可以通過顏色的深淺來區(qū)分不同類型的肌肉纖維。例如,快肌纖維ATP酶活性高,染色后呈深色,而慢肌纖維ATP酶活性低,染色后呈淺色。

實(shí)驗(yàn)流程:冰凍切片入水-ATP染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢。

結(jié)果判讀:Ⅰ型肌纖維呈黑色或深褐色,Ⅱ型肌纖維呈淺灰色或無色。

注意事項(xiàng):

1、切片質(zhì)量:切片需要保持完整和清晰,以便更好地觀察細(xì)胞形態(tài)和染色效果。

2、染色條件:染色液的濃度、pH值和染色時(shí)間等因素都會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,在實(shí)驗(yàn)前需要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定最佳的染色條件。

3、顯微鏡觀察:在觀察過程中需要使用高倍顯微鏡,并調(diào)整顯微鏡的光照和對比度等參數(shù),以獲得最佳的觀察效果。

4、實(shí)驗(yàn)安全:在實(shí)驗(yàn)過程中需要遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定,佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)用品,以防止染料和有害物質(zhì)的接觸和吸入。

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