培養(yǎng)基配制須知
隨著熒光定量PCR技術(shù)的成熟和熒光定量PCR儀的普及,用傳統(tǒng)的半定量方法檢測目的基因表達量的升高或者降低,已經(jīng)遠遠不能滿足當前科研的需要,針對當前研究的熱點基因,閃晶生物及時地從美國biosuper公司引進不同物種、不同基因的熒光定量PCR檢測試劑盒。該試劑盒包含了目的基因和內(nèi)參基因的引物、taqman探針(熒光探針)、反轉(zhuǎn)錄試劑、熒光定量PCR試劑、操作說明書等,用戶只需將提好的RNA加入就可以進行熒光定量PCR實驗,操作方便簡單、適合多種熒光定量PCR儀,同時也避免了自己設(shè)計、合成引物探針的煩惱。目前主要是人、大鼠、小鼠的大部分基因,其它物種的基因需來電或來信咨詢。
1、培養(yǎng)不同的微生物必須采用不同的培養(yǎng)條件;培養(yǎng)目的不同,原料的選擇和配比不同; 例如枯草芽孢桿菌: 一般培養(yǎng):肉湯培養(yǎng)基或 LB 培養(yǎng)基; 自然轉(zhuǎn)化:基礎(chǔ)培養(yǎng)基; 觀察芽孢:生孢子培養(yǎng)基; 產(chǎn)蛋白酶:以玉米粉、黃豆餅粉為主的產(chǎn)酶培養(yǎng)基;
根據(jù)不同的工作目的,微生物不同的營養(yǎng)需要,運用自己豐富的生物化學(xué)和微生物學(xué)知識來制*的培養(yǎng)基。
2、營養(yǎng)協(xié)調(diào)微生物細胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。
微生物細胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比例。
在大多數(shù)化能異養(yǎng)菌的培養(yǎng)基中,各營養(yǎng)要素間在量上的比例大體符合以下十倍序列的遞減 律: 要素:H2O>C 源+能源 >N 源 >P、S>K、Mg>生長因子
含量:(~10-1) (~10-2) (~10-3) (~10-4) (~10-5) A.選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),實驗室的常用培養(yǎng)基: 細菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基); 放線菌:高氏 1 號合成培養(yǎng)基培養(yǎng);
(~10-6)
酵母菌:麥芽汁培養(yǎng)基; 霉菌:查氏合成培養(yǎng)基; 實驗室一般培養(yǎng):普通常用培養(yǎng)基;
遺傳研究:成分清楚的合成培養(yǎng)基;
生理、代謝研究:選用相應(yīng)的培養(yǎng)基配方; B.營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適
營養(yǎng)物質(zhì)的濃度適宜, 營養(yǎng)物質(zhì)之間的配比適宜;
高濃度糖類物質(zhì)、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起 到抑制或殺菌作用。 培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn) 物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。
真菌需 C/N 比較高的培養(yǎng)基;(素食) 細菌(動物病原菌)需 C/N 比較低的培養(yǎng)基;(葷食) 發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸時:
碳氮比為 4/1 時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;
碳氮比為 3/1 時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產(chǎn)量則大量增加。
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