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一步法合成高得率、低雙鏈RNA(dsRNA)的加帽mRNA
TriLink的CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT 試劑盒包含通過體外轉錄 (IVT) 生產 mRNA 所需的所有組分，并采用 CleanCap® 共轉錄加帽技術。該試劑盒整合了創(chuàng)新的 mRNA 技術，可顯著提升實驗結果。
試劑盒中的核心組分CleanCap AG (3′ OMe)可產生 Cap 1 mRNA，其體內活性優(yōu)于由傳統(tǒng)共轉錄加帽方法(如 ARCA)產生的 Cap 0 mRNA。此外，與酶法加帽相比，使用 CleanCap AG (3′ OMe) 進行加帽，可提供更簡化和高效的 mRNA 生產流程。
三大優(yōu)勢：
1?? 超過95%的加帽效率
采用 CleanCap® AG (3' OMe) (CleanCap® AG 的改良版本)進行共轉錄加帽，用于提高蛋白表達，可一步高效地生成帶有Cap 1結構的 mRNA 產物。
2?? mRNA產量提升高達2倍
按照 TriLink 的 CleanScript® IVT 針對高產率和低雙鏈 RNA (dsRNA) 進行優(yōu)化過的方案合成mRNA，其產量可比標準 IVT 方案提升高達兩倍，達到 10 mg/mL。
3?? dsRNA降低幅度高達85%
試劑盒中的酶混合物包含新型的 CleanScribe™ RNA 聚合酶，替代野生型 T7 RNA 聚合酶，可進一步減少 dsRNA 的形成。
最-大-化 mRNA 產量，同時最小化 dsRNA 形成
圖一：按照 TriLink 的 CleanScript IVT 方案，在四種構建體上獲得的 mRNA 產量均顯著高于標準方案，提升幅度高達兩倍，達到約10 mg/mL。
圖二：在 IVT 中使用 CleanScribe RNA 聚合酶替代野生型 (WT) T7 RNA 聚合酶后，通過 ELISA 檢測三種 mRNA 構建體(無論是否含有 N1-甲基假尿苷 (N1MePsU) 修飾)的 dsRNA 形成量均顯著降低，可減少高達85%。
使用TriLink的IVT試劑盒，可獲得更穩(wěn)定的 mRNA
TriLink 的CleanCap AG (3' OMe) CleanScript IVT 試劑盒提供低 dsRNA 水平的 mRNA，可以最-大程-度減少由先天免疫系統(tǒng)激活引起的不良炎癥反應，并增強蛋白表達。
圖三：在 A549-Dual® 細胞中，使用 CleanScribe RNA 聚合酶比使用 WT T7 RNA 聚合酶合成的 mRNA 引發(fā)的免疫應答更低。Poly(I:C) 和 3p-hpRNA 為陽性對照。
圖四：使用CleanScribe RNA聚合酶合成的mRNA在A549細胞中表達的蛋白高于使用野生型T7 RNA聚合酶合成的mRNA。
訂購信息：
產品名稱 | 貨號 | 反應規(guī)格 |
CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit | K-7413-25 | 25x100μL 或 125x20μL |
試劑盒中組分信息：
Component | Concentration | Amount |
CleanCap® Reagent AG (3′ OMe) | 100mM | 10µmol |
Adenosine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
Cytidine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
Guanosine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
Uridine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
N1-Methyl-Pseudouridine-5′-Triphosphate | 100mM | 100µmol |
AG CleanScribe™ RNA Polymerase Mix | 10X | 250µL |
10X AG CleanScript™ IVT Buffer | 10X | 1mL |
FLuc Control Plasmid | 0.5µg/µL | 25µg |
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