使用賽默飛Veritipro96 PCR儀要注意哪些細(xì)節(jié)?
使用賽默飛VeritiPro 96 PCR儀時(shí),需注意以下關(guān)鍵細(xì)節(jié)以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和儀器的長(zhǎng)期穩(wěn)定性:
一、儀器放置與環(huán)境要求
1、將PCR儀放置在平穩(wěn)、干燥、通風(fēng)良好的位置,遠(yuǎn)離熱源和強(qiáng)電磁干擾源,避免影響溫控系統(tǒng)和電子元件。
2、環(huán)境溫度建議保持在18~35℃,濕度控制在60%左右,并配備功率≥3000W的穩(wěn)壓電源。
3、儀器之間應(yīng)保持50cm以上距離,以減少相互干擾。
二、操作前的準(zhǔn)備
1、檢查反應(yīng)管或96孔板是否密封良好,避免樣本泄漏影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
2、確保試劑在有效期內(nèi),儲(chǔ)存條件符合要求(如避光、低溫等)。
3、加樣時(shí)避免產(chǎn)生氣泡,使用同一吸液器和槍頭以減少交叉污染。
4、若樣本量較少,可在樣品槽兩側(cè)各加兩排8聯(lián)管,以保持熱蓋平整,提高加熱均勻性。
三、程序設(shè)置與運(yùn)行
1、程序設(shè)計(jì)完成后,務(wù)必仔細(xì)檢查溫度、時(shí)間和循環(huán)次數(shù),避免參數(shù)錯(cuò)誤導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
2、梯度PCR設(shè)置時(shí),相鄰梯度溫度差不得超過(guò)5℃。
3、運(yùn)行過(guò)程中切勿隨意打開(kāi)儀器門(mén),以免破壞溫度平衡。
4、對(duì)于短片段擴(kuò)增(100~300bp),可采用二溫度點(diǎn)法(如94℃變性,65℃退火/延伸),以提高效率。
四、使用后的清潔與維護(hù)
1、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,及時(shí)用95%乙醇或中性肥皂水清潔樣品槽和熱蓋,避免殘留核酸污染。
2、運(yùn)行50℃程序5~10分鐘,使殘留液體揮發(fā)。
3、長(zhǎng)期不使用時(shí),每隔半個(gè)月開(kāi)機(jī)自檢20分鐘,防止元件老化。
通過(guò)遵循以上細(xì)節(jié),可確保VeritiPro 96 PCR儀的高效運(yùn)行,同時(shí)提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和重復(fù)性。如需更詳細(xì)的操作指南,可參考儀器說(shuō)明書(shū)或相關(guān)技術(shù)文檔。
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