卡氏肺孢子蟲(Pneumocystis carinii)曾長期被歸類為原蟲,但基因分析顯示其核糖體RNA序列與真菌高度同源,現(xiàn)歸屬子囊菌門肺孢子菌屬(Pneumocystis spp.)。作為SPF級實驗動物設(shè)施的潛在風(fēng)險源,該屬病原在國標中被列為大、小鼠的必要時檢測項目——而這一要求的背后,是其在動物健康管理中的威脅性。
一、為何卡氏肺孢子蟲值得警惕?
1.“隱形”定植者
卡氏肺孢子蟲廣泛存在于大鼠、小鼠呼吸道中。在免疫健全動物體內(nèi),它通常呈無癥狀攜帶狀態(tài),常規(guī)病原篩查易漏檢。一旦動物遭遇實驗性免疫抑制(如藥物處理、基因編輯),或受環(huán)境應(yīng)激,病原體可迅速增殖引發(fā)致命性肺炎。
2.科研干擾
免疫正常動物可成為無癥狀攜帶者,可持續(xù)排毒。這種隱形攜帶會造成“數(shù)據(jù)污染”:對照動物隱性感染掩蓋組間差異;免疫抑制實驗時隱性感染爆發(fā),造成治療效果的誤判。另一方面,感染觸發(fā)特異性免疫應(yīng)答,干擾免疫研究結(jié)論;進行性器官損傷也可能混淆藥物毒性評估。
3.診斷困境
肺孢子蟲包囊壁厚且分布不均,可能存在隱性感染,導(dǎo)致傳統(tǒng)檢測方法在低載量時易漏診。如肺組織印片染色(如Giemsa法),其陽性率受限于:(1)蟲體在肺葉分布不均;(2)低感染負荷時漏檢率高。血清學(xué)檢測則因隱性感染普遍,抗體檢測難以區(qū)分活動性感染,臨床價值受限。
二、如何突破檢測瓶頸?
面對傳統(tǒng)檢測的局限,新一代分子技術(shù)——PCR技術(shù)仍能保持高靈敏度。比如翼和大小鼠病原體質(zhì)量控制多重qPCR檢測試劑盒采用Taqman熒光定量PCR技術(shù),能一次檢測多種病原體,滿足檢測多種微生物的需求,不僅減少了工作量,還降低了實驗成本,使用的Biowing®Optional Bacteria Primer&Probe能匹配到包含肺孢子蟲在內(nèi)的七項國標選檢病原菌。
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