一、銅綠假單胞菌概況
銅綠假單胞菌,因在代謝過程中產生水溶性的綠色色素,使傷口與創(chuàng)面呈綠色,又名綠膿桿菌,是一種條件致病菌。革蘭氏陰性桿菌,菌體長短不一,呈球桿狀或長絲狀,成對或成短鏈排列。菌體一端有一根鞭毛,運動活躍,無芽孢,無莢膜,專性需氧菌。生長溫度為35℃,42℃生長,4℃不生長。該菌對化學藥物的抵抗力比一般革蘭氏陰性菌強,且極易產生耐藥性。
因對營養(yǎng)要求不高,銅綠假單胞菌廣泛存在于水、土壤、空氣、以及人和動物機體皮膚及腸道中,對消毒劑、干燥、紫外線等理化因素及不良環(huán)境有較強的抵抗力,易形成生物膜,且形成生物被膜后不易被清除。作為條件致病菌,其主要產生胞外酶、內毒素、外毒素A等十余種致病因子,可引起化膿性感染、菌血癥、急性腸道疾病和皮膚炎癥等。潮濕的環(huán)境是銅綠假單胞菌存在的重要條件,因此常見有包裝飲用水銅綠假單胞菌不合格信息的發(fā)布。一般剛出廠的包裝飲用水中銅綠假單胞菌數(shù)量較少且分布不均勻,在出廠檢測時檢出率較低,但由于包裝飲用水尤其桶裝飲用水產品消費周期較長,在十幾天內即可繁殖達到10000 CFU/mL。這些致病菌可因大量飲水沖淡胃酸而避開人體消化道防御屏障,導致食源性疾病的發(fā)生。夏季是包裝飲用水消費量的季節(jié),而且氣溫更接近于銅綠假單胞菌的生長溫度,因此該季節(jié)是感染銅綠假單胞菌的高峰期,要引起高度重視和做好自身防護。
二、銅綠假單胞菌的檢驗標準
銅綠假單胞菌的檢驗原理為根據(jù)其在特定培養(yǎng)基上特定的生長、形態(tài)和生理生化特征,首先用孔徑為0.45?μm的濾膜將250?mL水樣中的微生物截留,再將濾膜移至 CN 瓊脂培養(yǎng)基上在36℃培養(yǎng)24小時~48小時, 使濾膜上的微生物得以生長,之后結合菌落的顏色、熒光特性及乙酰胺肉湯、氧化酶等生化試驗對疑似菌落進行確認,判定是否檢出及計數(shù)銅綠假單胞菌。我國現(xiàn)行檢驗標準為GB 8538-2016《食品安全國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法》中“57 銅綠假單胞菌”。
我國現(xiàn)行食品安全國家標準對銅綠假單胞菌的控制主要是針對包裝飲用水和飲用天然礦泉水:GB 19298-2014《食品安全國家標準 包裝飲用水》和GB 8537-2018《食品安全國家標準 飲用天然礦泉水》對銅綠假單胞菌的規(guī)定均為n=5,c=0,m=0(CFU/250ml)。香港《食品微生物含量指引》規(guī)定瓶裝/包裝飲用水(天然礦泉水除外)中銅綠假單胞菌的為0/250ml;天然礦泉水中銅綠假單胞菌的為n=5,c=0,m=0(CFU/250ml)。
國際上也制定有相應的質量標準和生產操作規(guī)范,并對銅綠假單胞菌進行規(guī)定。如國際食品法典委員會發(fā)布的CAC/RCP 33-2011《采集、加工和銷售天然礦泉水衛(wèi)生規(guī)范守則》的規(guī)定為n=5,c=0,m=0(CFU/250ml);歐盟98/83/EC《飲用水水質指令》對瓶裝或容器中出售的水中銅綠假單胞菌為0/250ml,2009/54/EC《天然礦泉水的開采和銷售指令》對生產和銷售過程中天然礦泉水中銅綠假單胞菌為0/250mL。
三、銅綠假單胞菌污染情況分析
近年來國家及省級食品監(jiān)管部門公布的數(shù)據(jù)表明,桶裝飲用水的銅綠假單胞菌的不合格率顯著高于一次性使用的瓶裝水。從國內桶裝飲用水生產工藝分析,即源水→初濾→精濾→去離子化[離子交換、反滲透(多為純凈水)及其他加工方法]→殺菌→灌裝封蓋[瓶(桶)及其蓋的清洗消毒]→燈檢→成品,在生產過程中污染銅綠假單胞菌的主要風險點有:(1)源水池保護不當造成微生物負載過高;(2)水處理工藝中,蓄水池或管道污染、過濾設備失效、臭氧消毒不;(3)操作人員在生產運輸過程中的不規(guī)范操作;(4)廠區(qū)外環(huán)境污染風險高、灌裝區(qū)環(huán)境監(jiān)測缺失、環(huán)境消毒不;(5)機器設備陳舊、清洗消毒工位少、設備消毒不;(6)包裝材料儲存環(huán)境不規(guī)范、回收桶清洗消毒不;(7)長期使用一種消毒劑、消毒劑配制和使用不規(guī)范、消毒劑濃度監(jiān)控和補充方式不科學;(8)產品質量把關能力和關鍵風險點監(jiān)控能力差或缺失,監(jiān)控手段不科學合理或頻次不足。
綜合分析,桶裝水生產企業(yè)多為中小型生產企業(yè),其生產過程控制不嚴格,生產設備自動化程度不高、消毒方式簡陋、手工程序多,導致作為水體和人體表常見菌的銅綠假單胞菌,污染可能性增大;桶裝水的包裝容器基本都是二次以上回收利用,該清洗環(huán)節(jié)為關鍵風險點。部分生產企業(yè)沒有專用大桶自動刷洗設備,僅僅靠手工刷洗及灌裝前在灌裝機上短暫的沖洗來解決桶內壁的污染問題,個別企業(yè)甚至用皮管手工灌裝,包裝材料消毒工藝消毒不,也易造成污染。另外,在運輸和存放過程中,因桶口與外部環(huán)境相通,桶中余水易滋生假單胞菌屬等水生微生物,被微生物污染后的回收桶若管理不當又會造成廠區(qū)生產環(huán)境的污染,從而形成惡性循環(huán)。
四、風險防控建議
消費者:購買前選擇取得食品生產許可證,信譽好、正規(guī)品牌的桶裝水生產企業(yè);購買時檢查桶的材質和封口,好的包裝桶由聚碳酸酯(簡稱PC)制成,桶體透明度高,表面光滑清亮,無雜質、斑點或氣泡,優(yōu)質桶裝水封口熱縮膜較厚,平整有光澤感;購買后盡快飲用,盡量在開封后一周內用完;定期對飲水機進行消毒。
生產企業(yè):嚴格按照GB 19304-2018《食品安全國家標準 包裝飲用水生產衛(wèi)生規(guī)范》以及《飲料生產許可審查細則(2017版)》要求進行生產過程微生物監(jiān)控;梳理生產的風險點尤其是關鍵風險點,結合生產過程的人、機、料、法、環(huán)等各要素,制定合理的工藝流程、監(jiān)控點、監(jiān)控頻次和監(jiān)控指標;加強企業(yè)內部實驗室建設,規(guī)范實驗室管理,提高質檢人員的檢驗能力,保證產品放行的合規(guī)性。
監(jiān)管部門:監(jiān)管部門可跟蹤桶裝水中銅綠假單胞菌的不合格原因排查,形成關鍵風險點防控,并進行行業(yè)預警和生產指導。同時,加大對桶裝飲用水科學飲用的科普宣傳。
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