檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒的操作注意事項(xiàng)
檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒是一種用于定量檢測樣本中ACL含量的酶聯(lián)免疫檢測工具。本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人檸檬酸水解酶(ACL)水平。用純化的人檸檬酸水解酶(ACL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入檸檬酸水解酶(ACL),再與 HRP 標(biāo)記的檸檬酸水解酶(ACL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹di洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的檸檬酸水解酶(ACL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人檸檬酸水解酶(ACL) 濃度。
檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒的檢測樣本:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、土壤、微生物裂解液等。
操作注意事項(xiàng):
樣本預(yù)處理:
組織樣本需按1:5~10比例加提取液冰浴勻漿,離心取上清。
避免反復(fù)凍融,防止酶活性降解。
實(shí)驗(yàn)流程:
加樣后需充分洗滌微孔板,減少非特異性結(jié)合。
顯色時間嚴(yán)格控制在15-30分鐘,避免過度反應(yīng)。
禁用范圍:僅限科研使用,不可用于臨床診斷。
安全與廢棄處理:
終止液含硫酸:操作時戴防護(hù)手套。
廢棄液體:用1M NaOH中和后排放。
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