LysoSensor Green DND-189溶酶體綠色熒光探針
【參數(shù)信息】
英文名稱:LysoSensor Green DND-189
中文名稱:溶酶體綠色熒光探針
分子式:C24H22N4O2
分子量:398.46
形態(tài):橙色溶液
激發(fā)波長(zhǎng):443nm
發(fā)射波長(zhǎng):505nm
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
LysoSensor Green DND-189熒光探針在酸性范圍內(nèi)具有良好的 pH 敏感性(pKa 約為 5.2),由于其較低的 pKa 值,
LysoSensor Green DND-189熒光探針只有在酸性范圍內(nèi)才有熒光。與LysoTracker 染色的細(xì)胞一樣, LysoSensor 染色的細(xì)胞中
溶酶體的熒光可能僅占總細(xì)胞熒光的一小部分,這將難以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)或熒光度計(jì)量來(lái)量化溶酶體數(shù)量或其 pH。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
溶酶體pH動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)
定量活細(xì)胞內(nèi)溶酶體酸化水平,如病毒感染(如β-冠狀病毒)致溶酶體堿化(pH從4.7升至5.7)。
自噬與溶酶體功能評(píng)估
結(jié)合自噬標(biāo)志物(如LC3),分析自噬流與溶酶體酸化協(xié)同作用。
細(xì)胞器特異性標(biāo)記
活細(xì)胞中酸性區(qū)室(溶酶體、頂體)的動(dòng)態(tài)成像。
【常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案】
熒光信號(hào)弱:
→ 提高工作濃度(≤5 μM)或延長(zhǎng)孵育時(shí)間(≤2 h)。
→ 確認(rèn)細(xì)胞活力(死細(xì)胞無(wú)pH梯度)。
非特異性染色:
→ 降低探針濃度,縮短孵育時(shí)間。
→ 用LysoTracker預(yù)染驗(yàn)證溶酶體完整性。
結(jié)果波動(dòng)大:
→ 嚴(yán)格避光操作,同步設(shè)置pH標(biāo)準(zhǔn)曲線
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