默克Millicell ERS 3.0數(shù)字細(xì)胞電阻儀操作指南
一、操作前準(zhǔn)備
環(huán)境與耗材
適用樣本 :
形成緊密單層的貼壁細(xì)胞(如Caco-2, MDCK, HUVEC)
兼容Transwell®(6/12/24孔板)、類器官芯片
溶液配置 :
使用無酚紅培養(yǎng)液 (避免電信號(hào)干擾)
電極浸泡液:0.9% NaCl溶液(滅菌后使用)
設(shè)備檢查 :
探頭無彎曲/污染,開機(jī)自檢顯示"Ready"
電量>30%(續(xù)航指示燈綠色)
二、標(biāo)準(zhǔn)化測量流程
STEP 1|系統(tǒng)校準(zhǔn)
長按電源鍵3秒啟動(dòng) → 主界面點(diǎn)擊"Calibrate" → 將探頭浸入專用校準(zhǔn)液 → 自動(dòng)完成(5秒)
STEP 2|電極平衡
將待測板置于水平臺(tái)面 → 探頭浸入板孔培養(yǎng)液(液面覆蓋電極環(huán)) → 靜置10秒穩(wěn)定
STEP 3|電阻測量
輕觸屏幕選擇孔位(如A1) → 探頭懸停于小室正上方 → 自動(dòng)測量 (0.5秒/孔) → 屏幕顯示Ω·cm2值
STEP 4|溫度補(bǔ)償
設(shè)備自動(dòng)讀取環(huán)境溫度 → 電阻值實(shí)時(shí)校準(zhǔn)(20-40℃范圍) → 數(shù)據(jù)標(biāo)注"T-comp"標(biāo)識(shí)
STEP 5|數(shù)據(jù)記錄
點(diǎn)擊"Save"保存當(dāng)前孔數(shù)據(jù) → 自動(dòng)生成板位編號(hào)(如Plate01_A1)
批處理模式 :勾選多孔位 → 一鍵完成整板檢測
STEP 6|結(jié)果導(dǎo)出
USB連接電腦 → 在"Data Log"菜單選擇導(dǎo)出格式(CSV/Excel)→ 包含時(shí)間戳、溫度、孔位ID
三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)(規(guī)避操作誤差)
誤差類型 | 解決方案 |
測量值漂移 | 測量前探頭浸泡NaCl溶液≥1min |
孔間數(shù)據(jù)波 | 確保培養(yǎng)液液面高度一致 |
背景電阻高 | 空載Transwell基底電阻<50Ω |
細(xì)胞層損傷 | 探頭距膜表面保持≥1mm間隙 |
Q1:如何判斷細(xì)胞單層已形成有效屏障?
? 電阻值達(dá)到細(xì)胞類型閾值(如Caco-2>300Ω·cm2),且連續(xù)3次測量波動(dòng)<5%
Q2:測量時(shí)是否需要移除培養(yǎng)液?
? 無需更換 !直接檢測培養(yǎng)體系,避免擾動(dòng)細(xì)胞層
Q3:數(shù)據(jù)異常如何排查?
? 按順序檢查:
① 探頭校準(zhǔn)記錄 → ② 膜孔無氣泡 → ③ 溫度補(bǔ)償啟用 → ④ 電極無蛋白吸附
Q4:能否用于膠原蛋白水凝膠模型?
? 支持!選擇"Low-Range"模式(0-500Ω·cm2),測量前靜置平衡30min
五、維護(hù)規(guī)范(延長設(shè)備壽命)
日常維護(hù) :
使用后以超純水沖洗探頭 → 浸入滅菌NaCl溶液存放
每月用70%乙醇擦拭機(jī)身
深度保養(yǎng) :
每6個(gè)月返廠校準(zhǔn)(免費(fèi))
探頭壽命≥5年(使用頻次≤20次/天)
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