Stressmarq SMC-401 產(chǎn)品技術(shù)詳析

來源：上海易匯生物科技有限公司 2025年08月06日 10:25

一、產(chǎn)品概述

Stressmarq SMC - 401 是一款科研價值的小鼠抗大鼠 SNAT1 單克隆 IgG1 抗體。其對應(yīng)靶點為鈉耦合中性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白 1（SNAT1），該蛋白由人類基因 SLC38A1 編碼，基因定位于 12q13.11 染色體區(qū)域。SNAT1 作為 SLC38 基因家族成員，在營養(yǎng)物質(zhì)攝取、能量生成、新陳代謝、解毒以及神經(jīng)遞質(zhì)循環(huán)等生理過程中發(fā)揮著作用。它主要負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運谷氨酰胺，谷氨酰胺作為尿素合成的中間產(chǎn)物，同時可能參與視網(wǎng)膜中谷氨酸的生成。在組織分布上，SNAT1 蛋白可在心臟、大腦和胎盤等部分組織中檢測到，且在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）內(nèi)特定神經(jīng)元群體中表達(dá)水平較高，而在星形膠質(zhì)細(xì)胞中則無表達(dá) 。

二、產(chǎn)品特性

（一）高特異性識別

SMC - 401 具備高度特異性，經(jīng)實驗驗證，能夠精準(zhǔn)識別目標(biāo)蛋白 SNAT1，在蛋白質(zhì)印跡（WB）實驗中，僅對約 50kDa 的目標(biāo)條帶產(chǎn)生反應(yīng)，不會與其他無關(guān)蛋白發(fā)生非特異性結(jié)合，有效減少實驗背景干擾，為科研人員提供清晰準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。例如，在對新皮質(zhì)神經(jīng)元在氨基酸饑餓條件下培養(yǎng)的裂解物進(jìn)行比色免疫印跡分析時，使用 SMC - 401 抗體，以山羊抗小鼠 IgG:HRP 作為二抗，僅需 1µg/ml 的 SMC - 401 就能成功檢測到 SNAT1 。這一特性在復(fù)雜的生物樣本檢測中尤為關(guān)鍵，能極大提升檢測結(jié)果的可靠性。

（二）廣泛的物種反應(yīng)性

該抗體展現(xiàn)出廣泛的物種反應(yīng)性，可與人類（Homo sapiens）、小鼠（Mus musculus）以及大鼠（Rattus norvegicus）的 SNAT1 蛋白發(fā)生特異性結(jié)合。這使得它在不同物種的相關(guān)研究中具有通用性，無論是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中利用小鼠、大鼠模型探究疾病機(jī)制，還是臨床研究中對人類樣本進(jìn)行分析，SMC - 401 都能發(fā)揮重要作用，為跨物種的生物學(xué)研究提供了有力工具。

（三）多應(yīng)用場景適配

SMC - 401 適用于多種實驗技術(shù)，包括蛋白質(zhì)印跡（WB）、免疫組織化學(xué)（IHC）、免疫細(xì)胞化學(xué) / 免疫熒光（ICC/IF）、流式細(xì)胞術(shù)（FCM）以及免疫沉淀（IP）。在 WB 實驗中，可通過特異性條帶檢測樣本中 SNAT1 蛋白的表達(dá)情況；IHC 實驗?zāi)軌驅(qū)M織切片中的 SNAT1 進(jìn)行定位和半定量分析，直觀展示其在組織中的分布；ICC/IF 技術(shù)則可在細(xì)胞水平上觀察 SNAT1 的表達(dá)與定位；FCM 可對細(xì)胞群體中的 SNAT1 陽性細(xì)胞進(jìn)行定量分析；IP 技術(shù)能夠從復(fù)雜樣本中分離出與 SNAT1 相互作用的蛋白復(fù)合物，助力深入探究 SNAT1 的生物學(xué)功能及相關(guān)信號通路。

三、實驗應(yīng)用指南

（一）免疫組織化學(xué)（IHC）應(yīng)用

樣本前處理：樣本固定宜采用 4% 多聚甲醛（PFA），且固定時間應(yīng)控制在 24 小時以內(nèi)，避免過度固定導(dǎo)致抗原表位被掩蔽，影響抗體與抗原的結(jié)合。對于需要脫鈣處理的樣本，應(yīng)避免使用酸性脫鈣劑，推薦采用乙二胺四乙酸（EDTA）進(jìn)行脫鈣，保留抗原活性。

實驗流程：首先進(jìn)行抗原修復(fù)，使用檸檬酸鈉緩沖液（pH6.0），在 95℃條件下處理 20 分鐘，以恢復(fù)被固定過程掩蓋的抗原表位。隨后用含有 5% 驢血清和 0.3% Triton X - 100 的封閉液在室溫下封閉 1 小時，減少非特異性背景染色。一抗孵育時，將 SMC - 401 按 1:1000 的比例稀釋，在 4℃條件下孵育過夜，確?？贵w與抗原充分結(jié)合。最后采用 HRP 標(biāo)記的二抗結(jié)合目標(biāo)抗體，并使用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）進(jìn)行顯色，注意避免使用金屬增強劑，防止背景染色加深。預(yù)期結(jié)果在人腦 Lewy 小體染色中，陽性信號呈現(xiàn)為棕褐色顆粒狀沉積，在 40 倍顯微鏡下清晰可見，而白質(zhì)區(qū)域應(yīng)無染色，以此作為背景控制。

（二）蛋白質(zhì)印跡（WB）應(yīng)用

樣本制備：確保樣本蛋白提取充分且保持完整性，可采用合適的細(xì)胞或組織裂解液進(jìn)行處理，并通過離心等手段去除雜質(zhì) 。

實驗條件：使用 12% Tris - Glycine 凝膠進(jìn)行電泳分離蛋白，轉(zhuǎn)膜至 0.2μm 的聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上，轉(zhuǎn)膜條件為 100V 恒壓 60 分鐘。轉(zhuǎn)膜后，用含有 5% 牛血清白蛋白（BSA）的 Tris 緩沖鹽水吐溫（TBST）溶液封閉膜 1 - 2 小時，以減少非特異性結(jié)合。將 SMC - 401 抗體按 1:1000 的比例稀釋于封閉液中，4℃孵育過夜。之后用 TBST 充分洗滌膜，再與 HRP 標(biāo)記的二抗孵育，最后通過化學(xué)發(fā)光法或顯色法檢測目標(biāo)條帶。預(yù)期在大鼠腦膜裂解物的 WB 分析中，能夠清晰檢測到約 50kDa 的 SLC38A1 蛋白條帶。

（三）免疫沉淀（IP）應(yīng)用

樣本準(zhǔn)備：收集適量細(xì)胞或組織樣本，裂解后獲取含有目標(biāo)蛋白的細(xì)胞裂解液，并通過預(yù)清除步驟去除可能與抗體非特異性結(jié)合的雜質(zhì) 。

實驗操作：將 SMC - 401 抗體與 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠進(jìn)行偶聯(lián)，形成抗體 - 磁珠復(fù)合物。將復(fù)合物加入細(xì)胞裂解液中，4℃緩慢搖晃孵育數(shù)小時，使抗體與目標(biāo)蛋白充分結(jié)合。通過磁力架或離心等方式分離磁珠或瓊脂糖珠，將結(jié)合有目標(biāo)蛋白及相關(guān)相互作用蛋白的復(fù)合物洗脫下來，用于后續(xù)的蛋白質(zhì)鑒定和分析，如質(zhì)譜分析等，以深入研究與 SNAT1 相互作用的蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò) 。

四、實驗注意事項與問題排查

（一）注意事項

樣本固定與處理：嚴(yán)格控制樣本固定時間和條件，避免過度固定或固定不足。對于不同類型的樣本，應(yīng)根據(jù)其特性選擇合適的固定劑和處理方法。在樣本處理過程中，要防止蛋白降解，可在裂解液中添加蛋白酶抑制劑。

抗體保存與使用：SMC - 401 抗體應(yīng)按照產(chǎn)品說明書要求進(jìn)行保存，一般需在 - 20℃條件下儲存，避免反復(fù)凍融，以免影響抗體活性。在使用前，應(yīng)將抗體從冰箱取出，在室溫下緩慢復(fù)溫，并輕輕混勻，避免劇烈振蕩。

實驗條件優(yōu)化：不同的實驗樣本和實驗?zāi)康目赡苄枰獙嶒灄l件進(jìn)行優(yōu)化，如抗體稀釋比例、孵育時間和溫度等。建議在正式實驗前進(jìn)行預(yù)實驗，摸索最佳實驗條件。

（二）問題排查

非特異性染色：若在 IHC 實驗中出現(xiàn)全片非特異性染色，可能是抗原修復(fù)過度所致，可嘗試將抗原修復(fù)時間縮短至 10 分鐘。此外，封閉不充分、二抗?jié)舛冗^高或孵育時間過長也可能導(dǎo)致非特異性染色，應(yīng)逐一排查并調(diào)整相應(yīng)實驗條件。

無目標(biāo)條帶（WB）：在 WB 實驗中若未檢測到目標(biāo)條帶，可能是樣本中目標(biāo)蛋白含量過低，可嘗試增加上樣量或濃縮樣本。另外，磷酸酶未被抑制可能導(dǎo)致目標(biāo)蛋白去磷酸化，影響抗體識別，可在樣本處理過程中添加 PhosSTOP 抑制劑。

染色不完整（IHC）：如果在 IHC 實驗中出現(xiàn)斑塊染色不完整的情況，可能是組織脫水不充分，可適當(dāng)延長梯度乙醇脫水時間，確保組織充分脫水，以利于抗體更好地滲透和結(jié)合。

Stressmarq SMC - 401 抗體憑借其高特異性、廣泛的物種反應(yīng)性以及多應(yīng)用場景適配性，在涉及 SNAT1 蛋白的科研領(lǐng)域中具有重要應(yīng)用價值 ?？蒲腥藛T在使用過程中，嚴(yán)格遵循實驗指南，注意樣本處理、抗體使用及實驗條件優(yōu)化等環(huán)節(jié)，并能根據(jù)出現(xiàn)的問題及時排查解決，定能充分發(fā)揮該產(chǎn)品的性能，為相關(guān)研究提供有力支持。

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