BUNSEN本生資訊|牛血清:快問快答
市面上用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要分為幾類?
目前市面上用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要分為四種類型:胎牛血清(FBS)、新生牛血清(NBCS)、小牛血清(CS)成牛血清(ABS),而胎牛血清因未接觸外界所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分相對(duì)較少,含胚胎發(fā)育必須生長因子等。
血清名稱 縮寫 采集時(shí)間 采集方法
胎牛血清 FBS 在母牛懷孕 5~8 個(gè)月 胎牛心臟密閉穿刺采血獲取的血潔
新生牛血清 NBCS 出生 12~24 小時(shí)未進(jìn)食新生牛 靜脈采血,亦有頸動(dòng)脈采血
小牛血清 CS 出生后 2 周至1年內(nèi)的小牛 靜脈取血
成牛血清 ABS 成牛 收集全血分離得
如何在外觀上一眼區(qū)分血清好壞?
淡黃色,透明——2小時(shí)以內(nèi)的國產(chǎn)新生牛血清,膽紅素含量較少;
金黃色,透明——產(chǎn)下較長時(shí)間的新生牛血清,一般超過2小時(shí)了;
金黃色,不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;
淡黃色,帶一點(diǎn)微紅,透明——等級(jí)最高的胎牛血清;
淡紅色,透明——普通的胎牛血清;
紅色偏深,透明——普通的胎牛血清,采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn);
紅色偏暗,透明——普通胎牛血清,保存不好,血紅蛋白氧化了;
紅色,不透明——小牛血清,透明度越差,牛齡越大。
正常情況下,融化后血清的外觀顏色應(yīng)該是?
血清為動(dòng)物來源,成分復(fù)雜,不同批次間會(huì)存在一些外觀上的差別。一般情況下,它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。
血清應(yīng)如何融解?
從冰箱中取出血清,放于2-8℃融化,融化過程中不時(shí)旋轉(zhuǎn)(swirling mix)混勻。充分融解后分裝或平衡到室溫后使用。
為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?
多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成,最常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。
為什么存放于冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?
在2-8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會(huì)形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時(shí)處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會(huì)發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會(huì)影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時(shí)間放置。
如何應(yīng)對(duì)血清的批間差?
全球康血清產(chǎn)品通過嚴(yán)格的質(zhì)控盡可能縮小批間差,但由于血清本身的特點(diǎn)和來源,無法避免批間差??蛻艨梢酝ㄟ^做預(yù)測試等方式,選擇可滿足要求的血清批次。
注:以上資料僅供參考,不同品牌產(chǎn)品可能存在設(shè)計(jì)差異,操作前建議參考說明書?。
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