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噬菌體污染時,添加賽多培®噬菌體抑制劑沒有效果的原因及解決辦法

來源:賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司   2025年08月06日 14:04  


賽爾瑞成“賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)”是一種在噬菌體污染環(huán)境中仍能夠進(jìn)行微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基添加劑,有效預(yù)防微生物發(fā)酵時噬菌體污染帶來的損失。噬菌體是一類侵害細(xì)菌(包括放線菌)的病毒,又稱細(xì)菌病毒,由于它的個體比細(xì)菌小數(shù)百倍,可以附著于塵埃上隨風(fēng)飄移,因此能長久地擴(kuò)散和傳播到一定的范圍,并能脫離寄主而存活。它在寄主細(xì)胞內(nèi)能大量迅速繁殖子代噬菌體,如在十幾分鐘至一個小時左右,一個細(xì)胞感染一個噬菌體后可以釋放出數(shù)十個至數(shù)百個子代噬菌體。一旦發(fā)生噬菌體污染,會導(dǎo)致發(fā)酵異常、倒罐,使科研和工業(yè)生產(chǎn)遭到嚴(yán)重?fù)p失。在發(fā)酵工業(yè)中,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵菌浸染噬菌體后,就要從菌種,培養(yǎng)基,環(huán)境,發(fā)酵系統(tǒng)管路,地溝,污水池,排風(fēng)口等進(jìn)行全面的消毒排查,消毒流程十分繁瑣。一般情況下,實驗室或生產(chǎn)線需要暫停發(fā)酵兩周到一個月的時間,嚴(yán)重影響實驗和生產(chǎn)進(jìn)度。


經(jīng)多次嚴(yán)格試驗測試,賽爾瑞成 “賽多培®噬菌體抑制劑(培養(yǎng)基添加用)”對溫和噬菌體和烈性噬菌體均具備出色的抑制作用,能夠?qū)崿F(xiàn)菌體的正常生長和蛋白表達(dá)。

噬菌體污染時,添加賽多培®噬菌體抑制劑沒有效果的原因及解決辦法


賽爾瑞成根據(jù)實際操作經(jīng)驗,可以通過下面方法對培養(yǎng)體系的污染情況進(jìn)行判斷:

如果只有細(xì)胞碎片,大概率是噬菌體污染;

如果OD600值在1以下時菌出現(xiàn)死亡(菌體生長1-3小時,誘導(dǎo)前),則考慮烈性噬菌體污染;

如果菌前期生長正常達(dá)到誘導(dǎo)條件,OD600值在0.8以上,菌在降溫誘導(dǎo)之后逐漸開始死亡(有些1-3小時,有些5小時左右),則考慮溫和噬菌體污染;

如果同一品種菌在多搖瓶中發(fā)生上述不同死菌現(xiàn)象,例如不同發(fā)酵周期,有些誘導(dǎo)前死,有些誘導(dǎo)后死,那么考慮混合型污染。

如果同時伴有白色絮狀物,或粘性的,或拉絲狀的,或蘑菇狀的,或有聚集狀白色的,則考慮伴隨雜菌污染。


添加賽多培®噬菌體抑制劑沒有效果的原因有多種,常見有如下原因及解決辦法:

搖瓶培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)過夜菌不長,大概率是菌種活性問題,同時也需要觀察是否存在培養(yǎng)條件失控、裝液量過大的情況;

解決辦法:需要重新轉(zhuǎn)化增加菌種活力,劃線再挑一次單克?。ㄆ桨迳弦残枰砑邮删w抑制劑)。

環(huán)境中噬菌體爆發(fā)期,多為噬菌體混合型污染(既有溫和噬菌體又有烈性噬菌體);

解決辦法:可以增加噬菌體抑制劑添加量到千分之六,極限千分之八,這個前提是這個添加量菌可以長起來,建議增加轉(zhuǎn)速(少量菌可能長得會非常慢,持續(xù)搖起來),后期正常后抑制劑添加量再降低。

實驗室內(nèi)部除了噬菌體之外,可能存在真菌、曲霉、金黃色葡萄球菌等雜菌污染;

解決辦法:需要進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理、執(zhí)行嚴(yán)格的無菌操作規(guī)范,以避免雜菌污染帶來的影響。




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