文章來源公眾號(hào)：生物研發(fā)筆記    作者：老周

自2017年守個(gè)產(chǎn)品Kymiriah獲批以來，CAR-T療法已經(jīng)在血液瘤領(lǐng)域取得巨大的成功。目前已有六款CAR-T療法被FDA獲批，包括4款靶向CD19和2款靶向BCMA的CAR-T產(chǎn)品。盡管如此，傳統(tǒng)自體CAR-T療法仍面臨三大核心瓶頸：

生產(chǎn)周期長(zhǎng)：體外改造涉及白細(xì)胞分離，病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)，體外激活擴(kuò)增等，整體下來需2-3周，患者可能因疾病進(jìn)展錯(cuò)過治療窗口。

生產(chǎn)成本高：CAR-T療法的單價(jià)約40-50萬美元（美國(guó)）或120萬人民幣（中國(guó)），總治療費(fèi)用更是高達(dá)百萬美元，在沒有完善商業(yè)醫(yī)保的發(fā)展中國(guó)家，高昂的費(fèi)用極大限制了該療法的可及性。

安全性風(fēng)險(xiǎn)：CAR-T治療需化療清除淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致感染風(fēng)險(xiǎn)增加，且神經(jīng)毒性等副作用顯著（如Carvykti的CRS發(fā)生率高達(dá)95%），異體CAR-T更是存在GVHD風(fēng)險(xiǎn)，需要復(fù)雜的基因編輯等前期工作。

為了克服傳統(tǒng)CAR-T的局限性，以亙喜生物為代表的Fast CAR-T平臺(tái)應(yīng)運(yùn)而生，該平臺(tái)主要有以下幾大優(yōu)勢(shì)：

生產(chǎn)流程革新：將細(xì)胞制備周期從數(shù)周壓縮至次日（24-48小時(shí)），通過優(yōu)化T細(xì)胞激活和轉(zhuǎn)導(dǎo)步驟，減少體外耗竭。

臨床優(yōu)勢(shì)顯著：核心產(chǎn)品GC012F（BCMA/CD19雙靶點(diǎn)）在治療新診斷多發(fā)性骨髓瘤（NDMM）的I期試驗(yàn)中，實(shí)現(xiàn)100%客觀緩解率（ORR）和100% MRD陰性嚴(yán)格完荃緩解（sCR），且僅6例輕度CRS（無神經(jīng)毒性）。

適應(yīng)癥拓展：帥先探索自免疾病，2023年獲FDA批準(zhǔn)開展難治性系統(tǒng)性紅斑狼瘡（rSLE）臨床試驗(yàn)，利用雙靶點(diǎn)設(shè)計(jì)深度清除致病性B細(xì)胞。

因看重其縮短生產(chǎn)時(shí)間、降低成本的潛力，阿斯利康2023年12月以12億美元收購(gòu)亙喜生物，揭開了Fast CAR-T的熱潮。然而，剛過去僅一年的時(shí)間，資本的熱潮又開始追逐起了In Vivo CAR-T(體內(nèi)CAR-T)技術(shù)。

與Fast CAR-T相比，In Vivo CAR-T技術(shù)巔覆在于其完荃跳過了體外生產(chǎn)環(huán)節(jié)，而是通過遞送系統(tǒng)直接在患者體內(nèi)生成CAR-T細(xì)胞，這就把生產(chǎn)成本降低至傳統(tǒng)CAR-T的10%，大幅提升CAR-T療法的可及性。另外，mRNA遞送系統(tǒng)的介導(dǎo)的體內(nèi)CAR-T只會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)短暫表達(dá)，避免了可能的基因毒性及細(xì)胞因子毒性，特別適用于自身免疫疾病。

早在2024年，艾伯維（AbbVie）就與Umoja Biopharma達(dá)成了合作獲得后者的CD19 靶向體內(nèi) CAR-T 候選藥物的讀家選擇權(quán)，并可拓展至額外4種CAR-T 療法。2025年1月，安斯泰來（Astellas）與 Kelonia Therapeutics 合作開發(fā)現(xiàn)貨型體內(nèi) CAR-T 療法；3月阿斯利康（AstraZeneca）收購(gòu)EsoBiotec獲得其工程納米抗體慢病毒平臺(tái)（ENaBL）生成的體內(nèi)BCMA CAR-T(ESO-T01)；5月原啟生物與 Umoja Biopharma 合作利用其VivoVec平臺(tái)開發(fā)多適應(yīng)癥體內(nèi) CAR-T；6月艾伯維收購(gòu)CAR-T之父Carl June參與創(chuàng)辦的 Capstan Therapeutics，獲得其靶向脂質(zhì)納米顆粒（tLNP）介導(dǎo)的mRNA 遞送以體內(nèi)生成CD8+ CAR-T 細(xì)胞的技術(shù)平臺(tái)。單是2025年上半年，頭部藥企交易總額就超過了32億美元，一系列大刀闊斧的并購(gòu)事件直接把In Vivo CAR-T推上了新一輪的資本熱潮。在本輪熱潮中，跨國(guó)藥企（MNC）通過收購(gòu)彌補(bǔ)技術(shù)缺口，中小型企業(yè)通過合作加速臨床轉(zhuǎn)化，醫(yī)藥圈又迎來一片欣欣向榮的局面。

盡管受到資本的熱烈追捧，但是In Vivo CAR-T仍然面臨著一些急需克服的困難和挑戰(zhàn)。

1.實(shí)體瘤的局限

體內(nèi)CAR-T更多一種生產(chǎn)工藝上的創(chuàng)新，傳統(tǒng)CAR-T在實(shí)體瘤中面臨的困境對(duì)于體內(nèi)CAR-T來說一樣不會(huì)少。

腫瘤微環(huán)境（TME）抑制：

實(shí)體瘤的免疫抑制微環(huán)境（如高表達(dá)TGF-β、PD-L1）可抑制CAR-T細(xì)胞浸潤(rùn)與活性，導(dǎo)致療效不佳。體內(nèi)生成的CAR-T可能尚未激活即被耗竭。

抗原異質(zhì)性：

實(shí)體瘤抗原表達(dá)不均，單一靶向CAR易漏殺低抗原表達(dá)的癌細(xì)胞。需開發(fā)多靶點(diǎn)CAR（如串聯(lián)CAR），但體內(nèi)共遞送多個(gè)基因的技術(shù)尚未成熟。

歸巢能力不足：

體內(nèi)生成的CAR-T需從循環(huán)系統(tǒng)遷移至腫瘤部位，但缺乏體外療法中預(yù)激活的趨化因子受體，導(dǎo)致腫瘤浸潤(rùn)效率低，未來可能需結(jié)合裝甲型CAR（Armored CAR）設(shè)計(jì)。

2.靶向精度與轉(zhuǎn)導(dǎo)效率

靶向特異性不足：

病毒載體（如慢病毒LV、腺相關(guān)病毒AAV）雖轉(zhuǎn)染效率高，但天然缺乏T細(xì)胞特異性，易感染肝細(xì)胞等其他組織，導(dǎo)致脫靶效應(yīng)和潛在毒性。即使通過工程化改造（如添加T細(xì)胞靶向配體或抗體，DARPin, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8,），仍難以玩全避免非目標(biāo)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)。

非病毒載體轉(zhuǎn)染效率低：

脂質(zhì)納米顆粒（LNP）或聚合物納米粒雖安全性更優(yōu)，但體內(nèi)轉(zhuǎn)染T細(xì)胞的效率遠(yuǎn)低于病毒載體。例如，LNP包裹的mRNA易被溶酶體降解，且從內(nèi)體逃逸至細(xì)胞質(zhì)的效率不足（<10%），導(dǎo)致CAR表達(dá)量低且短暫。雖然可以多次遞送，又容易被自身免疫系統(tǒng)識(shí)別，進(jìn)一步降低轉(zhuǎn)染效率。

3.安全性與免疫原性

插入突變致癌風(fēng)險(xiǎn)：

病毒載體（尤其慢病毒）可能隨機(jī)整合至宿主基因組，干擾抑癌基因或激活原癌基因，導(dǎo)致繼發(fā)性惡性腫瘤。FDA已對(duì)體外CAR-T療法提出相關(guān)警告，而體內(nèi)療法因無法進(jìn)行回輸前質(zhì)檢，風(fēng)險(xiǎn)更高。

免疫反應(yīng)與毒性：

載體本身（如AAV衣殼蛋白）可能引發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答，中和載體并降低療效，重復(fù)給藥受限。此外，體內(nèi)CAR-T可能誘發(fā)細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）或神經(jīng)毒性（ICANS），盡管其嚴(yán)重程度或低于體外CAR-T，但臨床數(shù)據(jù)尚不充分。

脫靶毒性：

非T細(xì)胞（如造血干細(xì)胞）若被轉(zhuǎn)導(dǎo)表達(dá)CAR，可能攻擊正常組織。例如，CD19 CAR若誤靶B細(xì)胞前體細(xì)胞，將導(dǎo)致B細(xì)胞發(fā)育障礙。

4.生產(chǎn)工藝與監(jiān)管挑戰(zhàn)

規(guī)模化生產(chǎn)難度：

病毒載體生產(chǎn)復(fù)雜、成本高昂（占療法總成本60%以上），且需滿足GMP標(biāo)準(zhǔn)；非病毒載體的靶向修飾工藝（如抗體-LNP偶聯(lián)）仍處于早期優(yōu)化階段。

質(zhì)量控制缺失：

體內(nèi)療法無法像體外工藝那樣進(jìn)行CAR-T細(xì)胞的功能驗(yàn)證（如擴(kuò)增能力、殺傷活性檢測(cè)），需依賴間接生物標(biāo)志物（如血清細(xì)胞因子水平）評(píng)估療效，增加臨床不確定性。

監(jiān)管路徑不明確：

現(xiàn)有監(jiān)管框架基于體外細(xì)胞療法制定，體內(nèi)療法因涉及基因治療載體，需重新定義安全性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（如長(zhǎng)期基因組整合風(fēng)險(xiǎn)）。

5.替代性療法的競(jìng)爭(zhēng)與挑戰(zhàn)

二代體外CAR-T的改進(jìn)：

新一代體外療法（如Galapagos的GLPG5101）已實(shí)現(xiàn)分散化生產(chǎn)，將“靜脈到靜脈”時(shí)間縮短至7天，部分解決了體內(nèi)療法的核心優(yōu)勢(shì)。Fast CAR-T甚至能將生產(chǎn)時(shí)間縮短至1-2天，進(jìn)一步壓縮生產(chǎn)帶來的成本。

雙抗藥物的崛起：

雙特異性抗體（如CD3/CD20為代表的T細(xì)胞銜接器）可模擬CAR-T作用機(jī)制，具備“即用性”和更低毒性，尤其在血液瘤領(lǐng)域可能擠壓體內(nèi)CAR-T的市場(chǎng)空間。

總結(jié)：

體內(nèi)CAR-T療法通過病毒載體與納米載體直接遞送CAR基因，有望撤底變革細(xì)胞治療范式，實(shí)現(xiàn) "即用型"（off-the-shelf）、低成本、無需化療預(yù)處理的癌癥治療。盡管當(dāng)下受到資本的熱捧，我們也不能忽視In Vivo CAR-T面臨的局限與挑戰(zhàn)，即如何實(shí)現(xiàn)高效、特異的體內(nèi)基因遞送，同時(shí)平衡安全性與持久療效。未來的競(jìng)爭(zhēng)將聚焦實(shí)體瘤突破和自免疾病治愈性方案的臨床落地，實(shí)體瘤微環(huán)境調(diào)控、規(guī)?；a(chǎn)及長(zhǎng)期安全性驗(yàn)證仍是未來5年需攻堅(jiān)的關(guān)鍵方向。目前全球大多數(shù)管線仍處于臨床前或發(fā)現(xiàn)階段，其最終臨床應(yīng)用仍需大規(guī)模臨床試驗(yàn)驗(yàn)證。