一、菌種簡介
艱難梭菌為革蘭陽性粗大桿菌,有鞭毛,卵圓形芽胞位于次。芽胞在外環(huán)境可存活數(shù)月。分離培養(yǎng)基常用環(huán)絲氨酸一甘露醇等特殊培養(yǎng)基。艱難梭菌能形成芽胞,對熱力、干燥、消毒劑等理化因素均有強大的耐受性,在干燥、消毒劑環(huán)境中可存活數(shù)月,在衣服、家具和環(huán)境中廣泛存在。
艱難梭菌是人類腸道正常菌群成員,不規(guī)范使用抗生素時,可導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)。耐藥的艱難梭菌大量生長繁殖,導(dǎo)致抗生素相關(guān)性腹瀉和偽膜性腸炎等疾病。
二、致病性
艱難梭菌是一種厭氧生長的革蘭陽性梭狀產(chǎn)毒芽孢桿菌,為人類腸道中的正常菌群,抗生素的應(yīng)用可導(dǎo)致該菌過度生長。自1978年開始,艱難梭菌被認為與抗生素相關(guān)性腹瀉有關(guān),曰前認為25%的抗生素相關(guān)性腹瀉由艱難梭菌引發(fā)。隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用,在范圍內(nèi),艱難梭菌相關(guān)性腹瀉發(fā)生率不斷升高,近年來出現(xiàn)暴發(fā)流行,其流行菌株發(fā)生基因變異,產(chǎn)生毒素的能力增加,患者病死率及病情復(fù)發(fā)率升高,已引起醫(yī)學(xué)界的重視。
艱難梭菌可產(chǎn)生兩種毒素:腸毒素和細胞毒素。腸毒素能趨化中性粒細胞浸潤回腸腸壁,釋放細胞因子,導(dǎo)致腸道大量失水和出血性壞死。細胞毒素能解聚肌動蛋白,損壞細胞骨架,導(dǎo)致局部腸壁細胞壞死,有直接損傷腸壁作用。
艱難梭菌感染大多數(shù)為無癥狀攜帶者。長期服用抗生素可引起內(nèi)源性感染。若易感人群較多,也可引起外源性感染。耐藥艱難梭菌能導(dǎo)致抗生素相關(guān)性腹瀉和假膜性結(jié)腸炎等疾病。
艱難梭菌感染引起腸炎,主要是結(jié)腸段的腸炎。長期大量應(yīng)用抗生素,尤其是作用于腸道細菌的廣譜抗生素,如氨芐西林、阿莫西林、克林霉素和各種頭孢菌素等,可殺滅或抑制腸道內(nèi)乳酸桿菌和雙歧桿菌等正常菌群的細菌,失去或減弱了對艱難梭菌的拮抗作用;而對這些抗生素耐藥的艱難梭菌則大量增殖,引起菌群失調(diào)。導(dǎo)致抗生素相關(guān)性腹瀉。
1、偽膜性腸炎(pseudomenbranous colitis,PMC):臨床表現(xiàn)為腹瀉、腹痛、伴有全身中毒癥狀,癥狀突然開始,并伴隨血壓低,嚴重時能致死。通常還伴有發(fā)燒,白細胞增多,之后可導(dǎo)致死亡,是很嚴重的一類疾病。
2、抗生素相關(guān)性腹瀉(antibiotic-associated diarrhoea):在體內(nèi)的潛伏期為5-10天,之后導(dǎo)致大量的棕色或水狀腹瀉,持續(xù)1周左右。
除上述疾病外,艱難梭菌尚可引起腎盂腎炎、腦膜炎、腹腔及陰道感染、菌血癥和氣性壞疽等。近年來該菌已成為醫(yī)院內(nèi)感染的病原菌之一,日益被人們所重視。
及時停用長期服用的抗生素,改用敏感藥物,后復(fù)發(fā)率較高(芽胞未被殺死)。
三、耐藥性
本菌對萬古霉素或甲硝唑敏感,對氨芐西林、頭孢菌素、林可霉素、克林霉素、紅霉素等耐藥。
四、診斷方法
1、毒素檢測:
組織細胞毒素檢測被認為是診斷的金標準,需時48小時,敏感性高,且能檢測毒素。
2、細菌培養(yǎng):
用環(huán)絲氨酸頭孢西丁果糖瓊脂培養(yǎng)基進行厭氧培養(yǎng),需時72小時,靈敏度高且可獲得菌株,不能檢測毒素。
3、谷氨酸脫氫酶檢測:
谷氨酸脫氫酶是艱難梭菌與梭菌屬其他細菌共同的非毒素蛋白質(zhì),采用乳膠凝集試驗,操作簡單快速(15-45分鐘),敏感性略低,且與其他厭氧菌存在交叉反應(yīng)。
4、基因診斷:
采用聚合酶鏈技術(shù)可檢測A毒素、B毒素、二元毒素以及高毒力的菌株,敏感性高。
5、膠乳(凝集)試驗(latex test):
膠乳綁定抗體后,加入過濾后的糞便濾液,觀察起凝集結(jié)果。
6、掃描試驗(screening test):
測試普通抗原后,跟隨其他特定試驗。病人的病史是重要的參考標準。
測試普通抗原可以測定產(chǎn)生毒素的艱難梭菌和不產(chǎn)生毒素的梭菌,也是診斷假膜性腸炎(PMC),抗生素相關(guān)腹瀉(AAD)的方法。確定仍需其他特定的方法。
7、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA):
是敏感性的鑒定方法,由于其設(shè)備昂貴則不作為基礎(chǔ)檢測。優(yōu)點為敏感和特異性高,得到結(jié)果的時間短。
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