DeNovix細(xì)胞計(jì)數(shù)器使用方法如下:
一、使用前準(zhǔn)備
儀器放置
確保儀器水平放置在穩(wěn)固的工作臺(tái)上,遠(yuǎn)離強(qiáng)電磁場干擾源(如電視、電腦、手機(jī)等),以防止電磁干擾影響性能。
檢查電源電壓是否在規(guī)定范圍內(nèi),避免因電壓不穩(wěn)定導(dǎo)致儀器損壞。
樣品準(zhǔn)備
臺(tái)盼藍(lán)染色法(用于活/死細(xì)胞分析):
制備4%臺(tái)盼藍(lán)母液:稱取4g臺(tái)盼藍(lán),加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾后4℃保存。
細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液按9:1混合(終濃度0.04%),輕輕吹打混勻。
樣品體積:根據(jù)儀器型號(hào)選擇合適體積(如CellDrop型號(hào)支持5.0µL高密度、10µL標(biāo)準(zhǔn)、40µL低密度樣品)。
儀器清潔
若先前的樣品在樣品室表面干燥或不易加載,需清潔樣品表面:
降下測(cè)量臂,將15µL 70%乙醇移入對(duì)準(zhǔn)槽和樣品室,等待10秒鐘。
用干燥的實(shí)驗(yàn)室擦拭巾用力擦拭上下表面,確保無殘留。
二、操作流程
啟動(dòng)儀器
按下電源按鈕,開啟儀器,顯示開啟界面。
啟動(dòng)Easy Apps計(jì)數(shù)應(yīng)用程序(部分型號(hào)如CellDrop自動(dòng)進(jìn)入測(cè)量界面)。
加載樣品
傳統(tǒng)型號(hào)(需細(xì)胞計(jì)數(shù)板):
將10µL樣品混合物加入到細(xì)胞計(jì)數(shù)板一側(cè)的計(jì)數(shù)池口中(計(jì)數(shù)板兩個(gè)計(jì)數(shù)池分別標(biāo)記為“A”和“B”)。
插入細(xì)胞計(jì)數(shù)板,確保插入正確(聽到“咔嗒”聲表示放置到位)。
CellDrop型號(hào)(無需載玻片):
放下測(cè)量臂,將10µL細(xì)胞懸液直接移入腔室。
等待細(xì)胞沉降(約數(shù)秒)。
調(diào)整與計(jì)數(shù)
實(shí)時(shí)預(yù)覽與對(duì)焦:
放下測(cè)量臂后開始實(shí)時(shí)預(yù)覽,檢查視野是否清晰。
觸摸對(duì)焦圖標(biāo),在查看明場時(shí)調(diào)整圖像,使活細(xì)胞呈現(xiàn)明亮的中心和黑暗的輪廓,死細(xì)胞呈均勻藍(lán)色。
曝光調(diào)整:
觸摸曝光圖標(biāo),選擇正?;虻推毓饽J?活細(xì)胞應(yīng)具有白色中心和深色環(huán))。
啟動(dòng)計(jì)數(shù):
按“計(jì)數(shù)(Count)”按鈕,儀器自動(dòng)分析并顯示結(jié)果(包括細(xì)胞濃度、尺寸、存活率等)。
可調(diào)整設(shè)門(gating)以排除碎片或另類細(xì)胞群(可選)。
按“優(yōu)化設(shè)置(Optimize Settings)”調(diào)整計(jì)數(shù)設(shè)置并重新分析圖像(可選)。
結(jié)果查看與保存
測(cè)量完成后,抬起測(cè)量臂(CellDrop型號(hào)),結(jié)果自動(dòng)保存。
在應(yīng)用程序中查看結(jié)果,或使用“數(shù)據(jù)(Data)”應(yīng)用重新分析保存的結(jié)果。
根據(jù)需要導(dǎo)出結(jié)果(支持Wi-Fi、USB、電子郵件、以太網(wǎng)等多種方式)。
三、使用后維護(hù)
清潔樣品室
用干凈、干燥的實(shí)驗(yàn)室擦拭巾擦除樣品,避免殘留物影響下次測(cè)量。
蓋上防塵蓋,防止灰塵進(jìn)入。
關(guān)閉儀器
關(guān)閉應(yīng)用程序,按下電源按鈕關(guān)閉儀器。
拔下電源插頭,確保安全。
定期校準(zhǔn)與保養(yǎng)
定期進(jìn)行校準(zhǔn)和性能檢查,確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
避免使用腐蝕性強(qiáng)的清潔劑,內(nèi)部清潔應(yīng)由專業(yè)人員進(jìn)行。
長期不用時(shí),存放在干燥通風(fēng)的環(huán)境中,防止灰塵和濕氣損害儀器。
四、DeNovix細(xì)胞計(jì)數(shù)器注意事項(xiàng)
操作規(guī)范
避免將氣泡引入樣品溶液中,混合或點(diǎn)樣時(shí)需緩慢操作。
避免在點(diǎn)樣后將樣品回抽至移液器吸頭,防止交叉污染。
確保所有樣品濃度在儀器的檢測(cè)范圍內(nèi)(如7×10²~4×10? cells/ml)。
安全防護(hù)
遵循制造商提供的安全操作規(guī)程,佩戴防護(hù)裝備(如手套、護(hù)目鏡)操作臺(tái)盼藍(lán)等染色劑。
若發(fā)現(xiàn)儀器故障或性能下降,及時(shí)聯(lián)系制造商或?qū)I(yè)技術(shù)人員維修。
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