凝膠色譜儀的操作流程較為簡(jiǎn)潔明了。樣品經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理后,通過進(jìn)樣裝置注入到色譜柱中,在設(shè)定好的流動(dòng)相流速和溫度條件下,儀器即可自動(dòng)完成分離過程,并通過檢測(cè)器對(duì)流出物進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)與數(shù)據(jù)采集。與其他一些復(fù)雜的分析儀器相比,它不需要繁瑣的衍生化步驟或特殊的反應(yīng)條件,減少了操作過程中可能引入的誤差和不確定性,同時(shí)也降低了對(duì)操作人員專業(yè)技術(shù)水平的要求,普通的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員經(jīng)過簡(jiǎn)單培訓(xùn)即可熟練掌握其操作方法。
由于凝膠色譜儀的分離機(jī)制主要基于固定的凝膠介質(zhì)孔徑和穩(wěn)定的流動(dòng)相條件,只要儀器參數(shù)設(shè)置保持一致,對(duì)于相同批次或相似性質(zhì)的樣品,其分離結(jié)果具有高度的可重復(fù)性。這一特點(diǎn)使得凝膠色譜儀在質(zhì)量控制、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檢測(cè)等需要高精度和穩(wěn)定性分析的應(yīng)用場(chǎng)景中具有重要價(jià)值,能夠?yàn)殚L(zhǎng)期的監(jiān)測(cè)和研究提供可靠的數(shù)據(jù)支持,保證不同批次實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的可比性和一致性。
凝膠色譜儀的測(cè)定步驟:
-開啟電源,使儀器各部件預(yù)熱至穩(wěn)定工作狀態(tài),一般預(yù)熱30分鐘至1小時(shí)。
-將凝膠色譜柱正確安裝在儀器上,連接好檢測(cè)器、高壓泵和進(jìn)樣閥等部件,注意色譜柱進(jìn)出口方向。
-把樣品溶解在合適溶劑中,過濾去除顆粒物和懸浮物,確保樣品濃度在適當(dāng)范圍。
-用空白溶劑平衡色譜柱,去除柱內(nèi)氣泡和雜質(zhì)。
-控制進(jìn)樣速度,將樣品準(zhǔn)確注入色譜柱,避免產(chǎn)生氣泡影響分離效果,如進(jìn)樣速度可控制在0.5毫升/分鐘左右。
-啟動(dòng)高壓泵,使樣品溶液以恒定流速通過色譜柱,不同分子量物質(zhì)因在凝膠色譜柱中停留時(shí)間不同而實(shí)現(xiàn)分離。
-記錄各組分在檢測(cè)器上的信號(hào),得到色譜圖。根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間、峰面積等信息,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù),計(jì)算樣品的分子量分布等相關(guān)參數(shù)。

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