人母親 DPP 同源物 4（Smad4）是 Smad 蛋白家族的重要成員，最初因與果蠅的母親 DPP 同源物具有序列相似性而得名。它是一種多功能的轉(zhuǎn)錄因子，廣泛存在于人體的多種組織和細(xì)胞中，如胃腸道、肺、乳腺、胰腺等組織的細(xì)胞內(nèi)均有表達(dá)。

Smad4 的基因定位于染色體 18q21.1，其編碼的蛋白質(zhì)包含 MH1（MAD homology 1）和 MH2（MAD homology 2）兩個(gè)高度保守的結(jié)構(gòu)域，以及一個(gè)連接兩者的中間區(qū)域。MH1 結(jié)構(gòu)域參與 DNA 的結(jié)合，MH2 結(jié)構(gòu)域則在蛋白與蛋白相互作用中發(fā)揮重要作用，包括與其他 Smad 蛋白的結(jié)合以及與上游受體激酶的相互作用。

在檢測(cè)指標(biāo)方面，Smad4 的表達(dá)水平通常以蛋白質(zhì)的濃度來表示，通過特定的檢測(cè)方法可準(zhǔn)確測(cè)定其在細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清等樣本中的含量，為相關(guān)疾病的研究和診斷提供重要數(shù)據(jù)支持。

生理功能

Smad4 在機(jī)體的生理過程中功能多樣，尤其在 TGF-β 超家族信號(hào)通路中扮演著關(guān)鍵角色：

介導(dǎo) TGF-β 超家族信號(hào)傳導(dǎo)：TGF-β 超家族成員包括 TGF-β、骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）等，它們?cè)诩?xì)胞的生長(zhǎng)、分化、胚胎發(fā)育等過程中發(fā)揮重要作用。當(dāng)這些細(xì)胞因子與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后，會(huì)激活下游的 Smad 蛋白。Smad4 作為共同介導(dǎo)子（co-Smad），能夠與被激活的受體調(diào)控的 Smad（R-Smad）形成異源復(fù)合物，該復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核后，與特定的 DNA 序列結(jié)合，從而調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄，實(shí)現(xiàn)信號(hào)從細(xì)胞外到細(xì)胞內(nèi)的傳遞。

調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)與分化：Smad4 通過參與 TGF-β 超家族信號(hào)通路，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化進(jìn)行精準(zhǔn)調(diào)控。在胚胎發(fā)育過程中，它參與了多種組織和器官的形成，如骨骼、腎臟、心血管系統(tǒng)等。在成體組織中，Smad4 有助于維持細(xì)胞的正常增殖速率，防止細(xì)胞異常增殖，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞向特定方向分化，以維持組織的結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定。

參與細(xì)胞凋亡與腫瘤抑制：Smad4 具有一定的腫瘤抑制功能，它可以通過調(diào)控相關(guān)靶基因的表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。當(dāng) Smad4 基因發(fā)生突變或缺失時(shí)，其介導(dǎo)的信號(hào)通路會(huì)出現(xiàn)異常，導(dǎo)致細(xì)胞的生長(zhǎng)失控，進(jìn)而增加腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，如胰腺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤中均發(fā)現(xiàn)了 Smad4 的異常表達(dá)。

人母親 DPP 同源物 4 (Smad4) ELISA 試劑盒的檢測(cè)原理及應(yīng)用

檢測(cè)原理

人母親 DPP 同源物 4 (Smad4) ELISA 試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的原理設(shè)計(jì)而成。該試劑盒的酶標(biāo)板微孔內(nèi)預(yù)先包被了抗人 Smad4 的特異性單克隆抗體，當(dāng)加入待檢測(cè)的樣本時(shí)，樣本中的 Smad4 會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。

洗滌去除未結(jié)合的雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗人 Smad4 多克隆抗體作為二抗，二抗會(huì)與復(fù)合物中的 Smad4 特異性結(jié)合，形成 “包被抗體 - Smad4 - 酶標(biāo)二抗” 的夾心結(jié)構(gòu)。再次洗滌后，加入底物溶液（如 TMB），HRP 會(huì)催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色的深淺與樣本中 Smad4 的含量成正比。最后，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算出樣本中 Smad4 的具體含量。