如何正確操作HLB固相萃取柱?
以下是HLB固相萃取柱的標(biāo)準(zhǔn)操作流程及關(guān)鍵注意事項:
一、預(yù)處理與活化?
甲醇活化?
加入6mL甲醇緩慢潤濕填料(流速≤1mL/min),確保柱床滲透。
目的:去除雜質(zhì)并激活疏水基團,同時避免篩板疏水導(dǎo)致的水潤濕失敗。
水平衡?
用3-6mL超純水或緩沖液沖洗,替換甲醇環(huán)境,建立親水疏水平衡。
二、上樣與清洗?
樣品加載?
將預(yù)處理后的樣品(建議pH 2-8)以1mL/min流速通過柱子。
高鹽樣品需稀釋或添加緩沖液改善流動性。
雜質(zhì)清洗?
用5%甲醇水溶液或緩沖液沖洗,去除極性雜質(zhì)(如鹽類)。
三、洗脫與干燥?
目標(biāo)物洗脫?
用2-5mL甲醇或乙腈分次洗脫,收集洗脫液(回收率≥95%)。
柱體維護?
使用后立即用甲醇沖洗保存,避免填料干涸。
四、關(guān)鍵注意事項?
流速控制?:全程保持≤1mL/min以確保充分接觸。
防干涸?:活化后柱床必須濕潤,干燥會導(dǎo)致吸附效率下降。
溶劑兼容性?:避免強氧化劑或pH(超出pH 1-14范圍)。
注:以上資料僅供參考,不作為實驗數(shù)據(jù),具體請咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師;
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