什么是單克隆抗體?單抗制備技術(shù)和原理 -賽默飛
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Dongping | 單克隆抗體的應(yīng)用 | 245 | |
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單克隆抗體 | 6,726 |
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什么是單克隆抗體?
單克隆抗體是通過(guò)將抗原注入到宿主動(dòng)物體內(nèi)啟動(dòng)機(jī)體免疫應(yīng)答而產(chǎn)生的。因而制作單克隆抗體的大多數(shù)操作都是在體外將來(lái)自這些宿主的脾細(xì)胞與培養(yǎng)的惡性骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。將細(xì)胞克隆分離出來(lái),融合步驟中存活下來(lái)的細(xì)胞稱(chēng)為雜交瘤。雜交瘤因骨髓瘤特性而可以永生,且容易在培養(yǎng)物中繁殖。
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單克隆抗體的特點(diǎn)
一些雜交瘤克隆因帶有B細(xì)胞特性而繼續(xù)合成并分泌針對(duì)單表位的遺傳學(xué)同源性抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。單克隆抗體與免疫動(dòng)物自身的天然免疫球蛋白同源,但單克隆抗體與血清純化的多克隆抗體不同,單克隆抗體對(duì)單表位具有特異性,并且因由雜交瘤體外產(chǎn)生而可長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)。
單克隆抗體源自雜交瘤細(xì)胞。它們的生產(chǎn)包括接種動(dòng)物(是小鼠),分離其脾細(xì)胞,然后同親本細(xì)胞融合。所得雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)表征后篩選克隆用于抗體生產(chǎn)。
優(yōu)勢(shì):
· 因?yàn)槭请s交瘤細(xì)胞庫(kù)生產(chǎn)出來(lái)的所以批次間一致
· 單表位結(jié)合
注意事項(xiàng):
· 隨著時(shí)間推移單克隆抗體會(huì)呈現(xiàn)細(xì)胞漂移
· 無(wú)多表位結(jié)合
· 需要考慮單克隆抗體的同型特異性
鼠單克隆抗體
我們提供的兔單克隆抗體其可用于多種應(yīng)用,包括熒光免疫分析、免疫組織化學(xué)技術(shù)、流式細(xì)胞分析、免疫印跡和 ELISA。與單克隆抗體一樣,鼠單克隆抗體只檢測(cè)抗原的一個(gè)表位,因此特異性更高,高效與抗原結(jié)合,且實(shí)驗(yàn)重復(fù)性較多克隆抗體更穩(wěn)定。
兔單克隆抗體
兔單克隆抗體源自雜交瘤細(xì)胞。它們的生產(chǎn)包括免疫原接種兔,分離其脾細(xì)胞,然后骨髓瘤細(xì)胞融合。所得雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)表征后篩選好的克隆用于抗體生產(chǎn)。
優(yōu)勢(shì):
· 使用兔全部天然抗體庫(kù)帶來(lái)的高特異性
· 單表位結(jié)合
· 兔中的單個(gè)同種型
注意事項(xiàng):
· 隨著時(shí)間推移,兔雜交瘤比小鼠雜交瘤更快呈現(xiàn)細(xì)胞漂移
· 無(wú)多表位結(jié)合
單克隆抗體和多克隆抗體之間的主要區(qū)別為何?
單克隆抗體 (mAb) 和多克隆抗體 (pAb) 在其來(lái)源、特異性和應(yīng)用方面基本不同。來(lái)自單細(xì)胞克隆的 mAb 通過(guò)與靶抗原上的 抗原決定簇結(jié)合而表現(xiàn)出出色的特異性,且其結(jié)構(gòu)一致。相比之下,pb 由 B 細(xì)胞的多個(gè)克隆產(chǎn)生,可提供更廣泛的抗原決定簇識(shí)別范圍,從而實(shí)現(xiàn)結(jié)構(gòu)多樣性。
mAb 的生產(chǎn)通常更耗時(shí)且成本高昂,從而適合于精準(zhǔn)的應(yīng)用,如診斷和靶向治療。另一方面,pAb 的生產(chǎn)速度更快且經(jīng)濟(jì)合算,能夠在各種研究應(yīng)用中發(fā)揮其多功能性。選擇單克隆或多克隆抗體取決于實(shí)驗(yàn)或應(yīng)用的特定要求,并需對(duì)靶向精度、成本和所需抗原決定簇識(shí)別的廣度等因素進(jìn)行考慮。
單克隆抗體與多克隆抗體的區(qū)別:關(guān)鍵差異
單克隆抗體:
· 源自 B 細(xì)胞的單克隆
· 可與單抗原決定簇結(jié)合—高度特異性
· 由于復(fù)雜的生產(chǎn)工藝,需較高的生產(chǎn)時(shí)間和較多的成本
· 常用于精準(zhǔn)的研究應(yīng)用,如診斷測(cè)定(ELISA與蛋蛋白質(zhì)免疫印跡等)和治療(例如靶向癌癥治療)
多克隆抗體:
· 源自 B 細(xì)胞的多個(gè)克隆
· 識(shí)別多個(gè)抗原決定簇—更廣泛的特異性
· 通用廣泛用于各種研究應(yīng)用
· 更快且更經(jīng)濟(jì)高效地生產(chǎn)產(chǎn)品
· 常用于需要廣泛特異性的研究應(yīng)用,如免疫組織化學(xué)技術(shù) (IHC)、免疫熒光 (IF)、蛋白質(zhì)免疫印跡與早期診斷檢測(cè)
單克隆一抗抗體
單克隆抗體是通過(guò)將抗原注入到宿主動(dòng)物體內(nèi)促動(dòng)的機(jī)體免疫應(yīng)答而產(chǎn)生的。應(yīng)答后,可以對(duì)相關(guān)的 B 細(xì)胞進(jìn)行篩選,選出所需的特異性抗體。宿主的這些細(xì)胞在體外與培養(yǎng)的惡性骨髓瘤細(xì)胞合并,產(chǎn)生雜交瘤。這些雜交瘤因骨髓瘤特征而可復(fù)制,并且可以輕松培養(yǎng)。一些雜交瘤克隆體在保持 B 細(xì)胞特性下,持續(xù)生產(chǎn)針對(duì)單抗原決定簇的基因均相抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。這些抗體與免疫動(dòng)物的天然免疫球蛋白非常相似,但不同于源自血清的多克隆抗體,因?yàn)檫@些抗體針對(duì)單個(gè)抗原決定簇具特異性,從而可確保穩(wěn)定且長(zhǎng)期的供應(yīng)。
用于單克隆一抗的宿主
考慮單克隆抗體的宿主物種對(duì)免疫原性、交叉反應(yīng)性、人源化的易程度與進(jìn)化的等諸多原因至關(guān)重要。
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