懸浮細胞
收貨后培養(yǎng)經(jīng)驗分享:
大多數(shù)懸浮細胞對于環(huán)境比較敏感,建議一直維持高密度生長,一般情況下細胞密度維持在1×10 5到1×10 6個/mL(不同細胞對密度要求不同)。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中800-1000rpm,離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例(shouci可以1:1分瓶,根據(jù)密度確定)分到新T25瓶或6cm皿中,添加5-6ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2或以上比例進行。
大多數(shù)血液類相關的懸浮細胞受運輸影響比較大,會出現(xiàn)一批死細胞,如果因此密度降低了,可以離心后轉移至T25瓶中豎著培養(yǎng),培養(yǎng)基添加5ml 以提高總體密度,隔一天后觀察密度可以的話再補液3ml培養(yǎng)基后T25瓶放倒,等沉淀穩(wěn)定后觀察細胞密度,持續(xù)添加培養(yǎng)基等密度上升足夠傳代為止。
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