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細胞活性定義及常用測定方法

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2025年08月13日 15:09  

細胞活性是指細胞在特定條件下能夠維持正常生命活動的能力,包括細胞的代謝、生長、分裂和對刺激的反應。在生物研究和醫(yī)學領域,細胞活性的檢測對于評估細胞健康狀態(tài)、藥物效果、細胞毒性以及細胞增殖能力等方面至關重要

1、細胞代謝檢測:

MTT法:通過活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶還原MTT生成不溶性的甲臜,來反映細胞活性。

CCK-8法:基于WST-8的比色法,檢測細胞增殖和毒性,生成的甲臜是水溶性的,簡化了操作步驟。

ATP生物發(fā)光法:利用細胞內ATP含量與活細胞數(shù)呈線性關系,通過熒光素酶催化反應檢測ATP,快速且靈敏。

Alamar Blue法:使用Alamar Blue試劑,通過檢測氧化還原狀態(tài)反映細胞代謝活性。

2、細胞計數(shù)檢測:

臺盼藍染色法:利用死細胞對臺盼藍的吸收性,通過顯微鏡計數(shù)區(qū)分活細胞和死細胞。

AO/PI染色法:吖啶橙(AO)和碘化丙啶(PI)的組合,用于區(qū)分活細胞、凋亡細胞和死細胞。

3、克隆(集落)形成試驗:

通過計算單個細胞形成克隆的能力來評估細胞增殖潛力,適用于抗腫瘤藥物敏感性試驗等。該方法較為繁瑣,耗時較長,不適合大規(guī)模樣本同時監(jiān)測。

4、DNA合成檢測:

使用EdU等胸腺嘧啶核苷類似物代替T滲入復制中的DNA,通過特異性熒光染料反應檢測DNA復制活性,反映細胞增殖情況。

這些方法各有優(yōu)缺點,選擇合適的檢測方法取決于實驗目的、所需檢測的細胞類型、實驗條件以及設備的可用性。在細胞活性檢測中,確保結果的準確性和重復性至關重要,因此在實驗設計和操作過程中需要嚴格控制變量,遵循標準操作程序。

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