一、臨床醫(yī)生閱讀微生物報告前需要了解的問題
首先是標(biāo)本類型,是來源于無菌部位還是有菌部位,如果是無菌部位,那培養(yǎng)的陽性結(jié)果與感染更相關(guān),如果是有菌部位,如呼吸道,要了解是否存在正常菌群或定植菌。
其次是標(biāo)本采集部位、采集方式。 如痰標(biāo)本,是咳痰、吸取物、肺泡盥洗液,還是防污染毛刷、氣切管分泌物。 如尿液標(biāo)本,是中段尿、導(dǎo)管尿,還是恥骨上穿刺尿。 如血標(biāo)本,是外周血、導(dǎo)管血,采血量是多少,抽了幾套血。 采血前是否使用抗生素,過去的微生物學(xué)檢查結(jié)果是什么。
二、痰標(biāo)本質(zhì)量評估
痰標(biāo)本易受到口咽部定值菌污染,不一定真正代表下呼吸道感染菌。送檢時必須痰涂片和培養(yǎng)同時開。采集前應(yīng)使用清水或生理鹽水漱口,有假牙的應(yīng)先取下假牙,囑病人采集深部咳痰,直接收集入無菌螺旋口痰杯。1-2小時內(nèi)送檢,否則苛養(yǎng)菌(肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等)易死亡。顯微鏡檢查取膿性部分涂片,做革蘭染色,每低倍鏡視野中鱗狀上皮細(xì)胞<10,白細(xì)胞>25,為合格下呼吸道標(biāo)本。
對照痰涂片結(jié)果,僅對優(yōu)勢菌進(jìn)行鑒定和藥敏試驗。非常強(qiáng)調(diào)痰涂片的重要性,不僅可以判斷痰標(biāo)本是否是下呼吸道標(biāo)本,甚至根據(jù)微生物的形態(tài)和特殊染色,可以初步判斷感染菌的類型,一個工作日內(nèi)可以發(fā)報告,有助于臨床盡早調(diào)整用藥。
例如,涂片提示可疑放線菌,放線菌是厭氧菌,需要厭氧環(huán)境培養(yǎng),可以提示臨床醫(yī)生加開厭氧菌培養(yǎng)申請單。需要臨床醫(yī)生的理解支持,才能鼓勵檢驗科老師大膽創(chuàng)新,更好的為臨床服務(wù)。
高質(zhì)量下呼吸道標(biāo)本包括:
1、支氣管肺泡灌洗液。定量培養(yǎng)>104CFU/ml,具有診斷意義。離心涂片>1%細(xì)胞為鱗狀上皮細(xì)胞提示污染,培養(yǎng)菌量可能假性提高。
2、保護(hù)性毛刷。毛刷約僅能獲得0.01-0.001ml標(biāo)本,在空氣中很快會干燥導(dǎo)致細(xì)菌死亡,從而影響檢出率,應(yīng)放置于1ml液體運(yùn)送培養(yǎng)基(如無菌生理鹽水和無菌肉湯),振蕩后,定量培養(yǎng)>103CFU/ml,具有診斷意義。
3、肺組織活檢。滴加少量無菌生理鹽水保持標(biāo)本濕潤,室溫送檢實驗室,禁止冷藏。
4、氣管吸取物:定量培養(yǎng)>106CFU/ml。
檢驗報告實例分析
1、痰培養(yǎng)結(jié)果為大腸埃希菌(超廣譜 β-內(nèi)酰胺酶陽性),加酶抑制劑的藥物敏感,碳青霉烯類藥物敏感。頭孢吡肟體外藥敏試驗結(jié)果“中介”時,提示為劑量依賴性敏感,建議給藥方案為2g,q8h。
2、痰培養(yǎng)結(jié)果為碳青霉烯耐藥的肺炎克雷伯菌,對亞胺培南、美羅培南耐藥,對阿米卡星、替加環(huán)素、米諾環(huán)素敏感,可以選擇。
3、如果痰涂片白細(xì)胞及上皮細(xì)胞數(shù)均大于25,考慮取材來源于下呼吸道,但有上呼吸道污染,如果看到大量的陰性球桿菌,且看到有白細(xì)胞吞噬的,考慮仍有意義,也會做培養(yǎng)及藥敏,但也建議重復(fù)留樣。
4、痰培養(yǎng)結(jié)果為碳青霉烯耐藥的銅綠假單胞菌,對亞胺培南、美羅培南耐藥,可能對阿米卡星、左氧、他啶、特日欣等仍可能有效。
5、痰培養(yǎng)結(jié)果為銅綠假單胞菌。其他的菌通常在一周以內(nèi)不重復(fù)做藥敏,但因為銅綠假單胞菌容易在治療3-4天后變得耐藥,易形成生物膜,因此在治療4天以后可能重復(fù)做藥敏,尤其是粘液型菌落,可能體外敏感,體內(nèi)耐藥,需加用破壞生物膜的藥物。
6、痰培養(yǎng)結(jié)果為碳青霉烯耐藥的鮑曼不動桿菌。亞胺培南、美羅培南耐藥,僅可能對替加環(huán)素、米諾環(huán)素敏感,舒普深中介或敏感。也有部分(約20-30%)的鮑曼不動桿菌對碳青霉烯敏感,但需要足夠的劑量,亞胺培南0.5,q6h;美羅培南0.5,q6h或1.0,q8h,才能達(dá)到體內(nèi)體外一致的效果。
7、非發(fā)酵菌天然耐藥表型。只做3種藥物的藥敏,因為有很多的天然耐藥。如洋蔥伯克霍爾德菌:僅替卡西林-克拉維酸、頭孢他啶、美羅培南、米諾環(huán)素、左氧氟沙星、甲氧芐啶-磺胺甲惡唑、氯霉素有折點(diǎn)。嗜麥芽窄食單胞菌:僅替卡西林-克拉維酸、頭孢他啶、米諾環(huán)素、左氧氟沙星、甲氧芐啶-磺胺甲惡唑、氯霉素有折點(diǎn)。
三、血培養(yǎng)
我國的血培養(yǎng)送檢率仍低于國外水平。
留取標(biāo)本要求:更推薦成人患者采集2-3套血培養(yǎng)(40-60ml),1套是指一個穿刺點(diǎn),通常為1個需氧菌+1個厭氧菌,每瓶8-10ml血量。一周內(nèi)不需要再采血送血培養(yǎng)。為什么使用需氧瓶+厭氧瓶?因為厭氧瓶有助于提高陽性率,厭氧瓶不僅僅針對厭氧菌,尤其對兼性苛氧菌,如肺炎鏈球菌等。
血培養(yǎng)結(jié)果中的報警時間是指從血培養(yǎng)瓶上機(jī)培養(yǎng)開始計算,到報警的時間。采血后及時上機(jī)培養(yǎng)。對于我們判斷是致病菌還是污染菌,有意義。
檢驗報告實例分析
1、如果血培養(yǎng)結(jié)果是金黃色葡萄球菌。如果對頭孢西汀敏感,對青霉素耐藥,稱為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌,對不穩(wěn)定的青霉素類耐藥,對穩(wěn)定的青霉素類敏感,對多種藥物敏感。如果對青霉素耐藥,對頭孢西汀耐藥,稱為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌,對所有酶類都耐藥,所以只做頭孢西汀的藥敏,只有選擇萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺有效。
2、如果血培養(yǎng)結(jié)果是表皮葡萄球菌。見的污染菌。是否污染,與采集的套數(shù)和陽性的套數(shù)有關(guān)。
四、總結(jié)
任何微生物報告的解讀都不能脫離臨床,需結(jié)合患者的臨床癥狀和體征、影像學(xué)及其他檢查結(jié)果,綜合分析。標(biāo)本類型、標(biāo)本質(zhì)量、采樣和送檢方式,是否存在定植菌或污染菌、采樣前是否使用抗菌藥物等,對微生物學(xué)結(jié)果有重要影響。微生物檢驗報告內(nèi)涵豐富和信息量大,加強(qiáng)臨床和實驗室溝通,充分挖掘和利用微生物檢驗結(jié)果。
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