PARP2，也稱為聚（ADP-核糖）聚合酶2或NAD? ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶2，是PARP家族的一部分。ADP核糖基化（即將ADP-核糖添加到蛋白質(zhì)上）是一種可逆的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，主要涉及DNA損傷響應(yīng)（DDR）途徑。聚ADP核糖基化（稱為PARylation）是添加線性或分支的ADP核糖鏈。PARP2參與DNA修復(fù)（只有10%的PARP活性歸因于PARP2），但也參與氧化應(yīng)激和線粒體分裂。DDR和氧化應(yīng)激途徑的功能失調(diào)可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。PARP2的基因敲除表明其在脂肪生成、精子生成和胸腺細(xì)胞存活中的作用。PARP2也是核受體（如雌激素受體ER和過氧化物酶體增殖物激活受體PPAR）的輔助因子。PARP2在前列腺癌（PCa）中過表達(dá)，可能通過FOXA1（叉頭框蛋白A1）/AR途徑促進(jìn)疾病發(fā)展。PARP抑制劑已在癌癥治療中取得成功，臨床上批準(zhǔn)的抑制劑同時靶向PARP1和PARP2。進(jìn)一步了解涉及PARP2的分子途徑及其對疾病的影響，將繼續(xù)為PARP2相關(guān)疾病的新療法鋪平道路。

PARP2比色法檢測試劑盒旨在用于檢測PARP2（聚（ADP-核糖）聚合酶2）活性，適用于篩選和分析應(yīng)用。PARP2檢測試劑盒采用便捷的96孔板格式，包含100次酶反應(yīng)所需的純化PARP2酶（氨基酸2-583）、反應(yīng)底物和PARP檢測試劑緩沖液。組蛋白蛋白預(yù)先包被在96孔板上。接下來，將生物素化的NAD?混合液（稱為PARP底物混合液）與PARP2酶和活化的DNA模板在優(yōu)化的檢測試劑緩沖液中孵育。然后，將鏈霉親和素-HRP處理該板，隨后加入比色法HRP底物，生成有色溶液。生成的信號與PARP2活性成正比。

艾美捷BPS Bioscience-PARP2比色檢測試劑盒：

貨號：80581

同義詞：聚(ADP-核糖)聚合酶2、聚(ADP-核糖基)轉(zhuǎn)移酶2、ADPRT、PARP2、PARP-2

試劑盒格式：比色法

適用物種：人類

靶標(biāo)：PARP2

儲存/穩(wěn)定性：當(dāng)按照說明儲存時，該檢測試劑盒在收到之日起6個月內(nèi)可達(dá)到最佳性能。

應(yīng)用：研究酶動力學(xué)，并用于藥物發(fā)現(xiàn)和高通量篩選（HTS）應(yīng)用中的小分子抑制劑篩選。

運輸溫度：-80°C

所需材料（但試劑盒未提供）

1x PBS（磷酸鹽緩沖液）

PBST緩沖液（1x PBS，含0.05% Tween-20）

能夠在λ=450 nm處讀取吸光度的紫外/可見光分光光度計微孔板讀取器*

2 M硫酸（水溶液）

可調(diào)節(jié)微量移液器及無菌吸頭

軌道振蕩器

或者，也可以使用在650 nm處讀取的分光光度計，但檢測靈敏度將大大降低。

檢測結(jié)果示例：

圖：奧拉帕尼（Olaparib）和AZD-5305對PARP2活性的抑制作用

將PARP2與逐漸增加濃度的奧拉帕尼（Olaparib）和AZD-5305（編號#78318）共同孵育。使用Tecan紫外/可見光分光光度計微孔板讀取器測量吸光度。

文獻(xiàn)參考：

Brown, J.A., Marala, R.B. 2002. J. Pharmacol. Toxicol. Methods 47:137-41.

Gui B., et al., 2019 Proc Natl Acad Sci USA 116 (29): 14573-14582.