一、背景及概述

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂是平板計數(shù)法中的選擇性計數(shù)培養(yǎng)基，使用量巨大?，F(xiàn)行的國標(biāo)規(guī)定ＶＲＢＡ的配制需煮沸2min3次，耗時費(fèi)力且操作容易有燙傷和培養(yǎng)基噴射的危險。如何配制高效ＶＲＢＡ、減少實(shí)驗(yàn)中的操作風(fēng)險，已成為食品微生物實(shí)驗(yàn)室檢測大腸菌群面臨的一個急需解決的問題。

二、制備方法

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂用于大腸菌群的固體平板檢測。

1）用于檢測原料膠中大腸菌群含量。

方法包括：

(1)將原料膠置于含有生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，進(jìn)行均質(zhì)處理，得到均質(zhì)處理產(chǎn)物；

(2)將均質(zhì)處理產(chǎn)物置于無菌均質(zhì)袋中，再向無菌均質(zhì)袋中加入結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基，并進(jìn)行第二均質(zhì)處理，得到第二均質(zhì)處理產(chǎn)物；

(3)將含有第二均質(zhì)處理產(chǎn)物的均質(zhì)袋進(jìn)行平整化處理；

(4)將經(jīng)過平整化處理的含有第二均質(zhì)處理產(chǎn)物的均質(zhì)袋進(jìn)行靜置培養(yǎng)，得到可疑大腸菌群菌落；

以及(5)將可疑大腸菌群菌落接種于含有煌綠乳糖膽鹽肉湯培養(yǎng)基的試管中進(jìn)行培養(yǎng)，以便確定大腸菌群菌落數(shù)，進(jìn)而確定對原料膠中大腸菌群含量。

本發(fā)明的方法能夠有效提高檢出率，準(zhǔn)確性強(qiáng)。

2）制備一種大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每1000mL培養(yǎng)基含有如下重量的組分：

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂15-25g、特異性酶顯色底物5-25g、二甲基甲酰胺0.05-20g、酵母粉1-5g、乳糖1-8g、氯化鈉5-10g、磷酸氫二鉀3-5g、磷酸二氫鉀0.5-2g、月桂基硫酸鈉0.1-0.3g。本發(fā)明還提供了一種含有所述大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基的檢測試紙。

本發(fā)明采用兩種特異性酶顯色底物進(jìn)行復(fù)配使用，其對于大腸菌群的特異性和敏感度較單獨(dú)使用任何一種顯色底物顯著增強(qiáng)，且檢出率高、檢出時間短。

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