手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
相較于其他依賴復(fù)雜化學(xué)相互作用(如離子交換、親和作用)的色譜方法，國(guó)產(chǎn)凝膠滲透色譜僅基于分子物理尺寸差異進(jìn)行分離，無(wú)需繁瑣的衍生化步驟或嚴(yán)苛的洗脫條件優(yōu)化。只要選擇合適的凝膠孔徑范圍，就能對(duì)寬分子量分布的聚合物、蛋白質(zhì)等混合物快速分離，大大縮短分析周期，提升實(shí)驗(yàn)效率。
從高分子量的聚合物(如聚乙烯、聚苯乙烯等)到低分子量的有機(jī)小分子、多糖，乃至生物大分子中的蛋白質(zhì)復(fù)合物、核酸等，國(guó)產(chǎn)凝膠滲透色譜均可應(yīng)對(duì)。其能承受較寬的流速范圍與多樣的溶劑體系，無(wú)論是極性還是非極性溶劑溶解的樣品，都有機(jī)會(huì)在這“通用篩”上得到準(zhǔn)確剖析，為多學(xué)科研究提供有力支撐。
分離過(guò)程中，樣品分子與凝膠填料間僅為物理接觸，不存在強(qiáng)化學(xué)吸附或反應(yīng)導(dǎo)致的結(jié)構(gòu)破壞、活性喪失問(wèn)題。而且在洗脫環(huán)節(jié)，各組分能高效富集收集，回收率常常高達(dá)接近 100，利于后續(xù)對(duì)分離組分的進(jìn)一步研究利用，如純度檢測(cè)、結(jié)構(gòu)表征或功能測(cè)試等。
由于分離原理的線性與穩(wěn)定性，國(guó)產(chǎn)凝膠滲透色譜在測(cè)定樣品中不同分子量組分的相對(duì)含量時(shí)表現(xiàn)出色。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照或建立校正曲線，能夠準(zhǔn)確量化各組分占比，為高分子材料的性能評(píng)估(如分子量分布對(duì)強(qiáng)度、韌性影響)、生物制品的質(zhì)量控制(如蛋白質(zhì)藥物的聚合態(tài)監(jiān)測(cè))提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)依據(jù)。
國(guó)產(chǎn)凝膠滲透色譜(GPC)的測(cè)定步驟：
1.前期準(zhǔn)備：
-樣品溶解：選取合適溶劑溶解樣品，難溶樣品可加熱、攪拌或超聲輔助。注意控制樣品濃度，一般為2 -5mg/mL。
-樣品過(guò)濾：用特定孔徑濾膜(有機(jī)相樣品用0.45μm濾膜，水相樣品用0.22μm濾膜)過(guò)濾樣品溶液，去除雜質(zhì)和不溶物。
-儀器預(yù)熱：打開(kāi)儀器電源，啟動(dòng)泵系統(tǒng)，讓流動(dòng)相循環(huán)使儀器達(dá)穩(wěn)定工作狀態(tài)，同時(shí)檢查儀器各部件是否正常。
2.參數(shù)設(shè)置：
-流動(dòng)相選擇與流速設(shè)定：根據(jù)樣品性質(zhì)和色譜柱要求選流動(dòng)相，常見(jiàn)有四氫呋喃、甲苯、二甲基甲酰胺等。流速一般在0.5 -1.5ml/min之間，避免過(guò)快影響分離效果或過(guò)慢延長(zhǎng)分析時(shí)間。
-柱溫設(shè)定：依樣品和色譜柱情況選柱溫，通常在20 -60℃之間，溫度影響分子運(yùn)動(dòng)和與固定相作用。
-檢測(cè)器參數(shù)設(shè)置：按檢測(cè)器類型設(shè)參數(shù)，如示差折光檢測(cè)器設(shè)靈敏度、衰減等，紫外檢測(cè)器設(shè)檢測(cè)波長(zhǎng)等。
3.樣品進(jìn)樣：
-手動(dòng)進(jìn)樣：若為手動(dòng)進(jìn)樣器，用注射器吸取50 -100μl樣品溶液，插入進(jìn)樣口緩慢注入，避免氣泡和漏液。
-自動(dòng)進(jìn)樣：若配備自動(dòng)進(jìn)樣器，按操作界面提示設(shè)進(jìn)樣體積、速度等參數(shù)，將樣品溶液放樣品盤中，儀器自動(dòng)進(jìn)樣。
4.數(shù)據(jù)采集與分析：
-基線穩(wěn)定：樣品進(jìn)柱前等基線穩(wěn)定，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
-數(shù)據(jù)采集：樣品進(jìn)柱后，檢測(cè)器實(shí)時(shí)檢測(cè)組分濃度變化并轉(zhuǎn)化為電信號(hào)傳輸給數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)，記錄各時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度形成色譜圖。
-數(shù)據(jù)分析：據(jù)色譜圖得各組分保留時(shí)間、峰面積、峰高等信息，計(jì)算樣品分子量分布、平均分子量等參數(shù)，還可與標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖對(duì)比定性未知組分。
5.儀器清洗與維護(hù)：
-清洗色譜柱：分析結(jié)束后用合適溶劑清洗色譜柱，去除殘留樣品和雜質(zhì)，清洗時(shí)間和流速可調(diào)整。
-關(guān)機(jī)：清洗完成后關(guān)泵系統(tǒng)和檢測(cè)器電源，按操作規(guī)程關(guān)儀器總電源，清潔維護(hù)儀器。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心