TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是一種用于檢測細(xì)胞凋亡過程中細(xì)胞核DNA斷裂的試劑盒,其原理基于末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT Enzyme)的作用,能夠特異性地標(biāo)記凋亡細(xì)胞,在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
細(xì)胞凋亡時,基因組DNA會發(fā)生斷裂,暴露出3'-羥基(3'-OH)末端。TUNEL試劑盒利用TdT酶將標(biāo)記的核苷酸(如生物素-dUTP、FITC-dUTP或紅色熒光素KeyFluor555-dUTP)連接到這些斷裂的DNA末端,通過后續(xù)顯色或熒光檢測,特異性定位凋亡細(xì)胞。
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒類型與特點:
根據(jù)標(biāo)記物和檢測方法的不同,TUNEL試劑盒可分為以下類型:
顯色型(POD法)
標(biāo)記物:生物素-dUTP + 辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素。
顯色反應(yīng):HRP催化DAB(二氨基聯(lián)苯胺)產(chǎn)生棕色沉淀,光學(xué)顯微鏡下觀察。
特點:無需熒光設(shè)備,成本低,適合普通實驗室;但靈敏度略低于熒光法。
熒光型(FITC/TMR/KeyFluor555標(biāo)記)
標(biāo)記物:FITC-dUTP、TMR-dUTP或KeyFluor555-dUTP。
檢測方法:熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀觀察。
特點:
高靈敏度:可檢測早期凋亡細(xì)胞。
多色檢測:可與DAPI(核染色)或其他熒光標(biāo)記聯(lián)用,實現(xiàn)多參數(shù)分析。
快速簡便:部分熒光型試劑盒支持一步染色,縮短實驗時間。
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