真空離心濃縮儀在RNA/DNA研究中的創(chuàng)新應(yīng)用與技術(shù)實(shí)踐
真空離心濃縮儀在RNA/DNA研究中的創(chuàng)新應(yīng)用與技術(shù)實(shí)踐
核酸研究領(lǐng)域?qū)悠芳兌群蜐舛鹊母咭笸苿?dòng)了實(shí)驗(yàn)技術(shù)的持續(xù)革新。在眾多樣品制備工具中,真空離心濃縮儀憑借其溫和、高效、高通量的特性,逐漸取代了傳統(tǒng)的乙醇沉淀法和自然蒸發(fā)法,成為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室至關(guān)重要的設(shè)備。其三重作用機(jī)制——真空降低溶劑沸點(diǎn)、離心力溫和加熱加速蒸發(fā)——使研究人員能夠在極短時(shí)間內(nèi)完成微量核酸樣本的高倍濃縮,同時(shí)很大程度保持生物分子活性。
一、真空離心濃縮技術(shù)的基本原理
真空離心濃縮儀通過三重協(xié)同作用實(shí)現(xiàn)高效濃縮:
(一)真空系統(tǒng)(50-100 mbar)降低溶劑沸點(diǎn),使揮發(fā)性溶劑在低溫下即可蒸發(fā)。上海般諾生物科技有限公司作為專業(yè)生產(chǎn)智能化真空離心濃縮儀的廠商,其旗下“般諾BIONOON”品牌真空離心濃縮儀的極限真空度可達(dá)1mbar,并且可根據(jù)各地區(qū)地理環(huán)境及氣壓不同,自動(dòng)調(diào)整真空控制度。
(二)離心力(1000-1500 rpm)產(chǎn)生向心力,防止液體暴沸并避免樣品交叉污染。上海般諾生物科技有限公司生產(chǎn)的BIONOON VAC-P1,BIONOON VAC-AIO等型號(hào)的真空離心濃縮儀其離心力最高可達(dá)2000rpm,可實(shí)現(xiàn)不同實(shí)驗(yàn)環(huán)境下不同樣品對(duì)離心力的需求。
(三)精準(zhǔn)溫控(通常30-60℃)提供可控?zé)崮芗铀偃軇]發(fā)。上海般諾生物科技有限公司生產(chǎn)的真空離心濃縮儀腔體溫度范圍更廣,從-10℃~100℃可自由設(shè)定,能滿足不同樣品對(duì)溫度的不同需求。尤其針對(duì)蛋白質(zhì)等熱敏性樣品,其BIONOON VAC-RP1型號(hào)的真空冷凍離心濃縮儀,腔體溫度可達(dá)-10℃,且具有五段階段溫控功能,可設(shè)置不同時(shí)間下不同的溫度需求。其真空離心濃縮儀玻璃蓋,具有加熱功能,可在低溫濃縮時(shí)快速去除玻璃蓋上的冷凝水,清晰觀察樣品濃縮情況。
在這三重功能的協(xié)同運(yùn)作下,真空離心濃縮儀可使DNA/RNA樣品在30-60分鐘內(nèi)從50μL高效濃縮至5μL,回收率高達(dá)95%以上,遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)乙醇沉淀法20%的回收率損失和長達(dá)數(shù)小時(shí)的操作時(shí)間,尤其適用于少量且昂貴的樣品濃縮。
二、真空離心濃縮儀在核酸研究中的核心優(yōu)勢
(一) 生物活性保護(hù)能力
1. 低溫濃縮:30-40℃的溫和溫度環(huán)境可避免RNA降解(如28S/18S rRNA條帶保持完整)和DNA變性(如超長片段DNA無斷裂);
2. 防止樣品污染:真空離心濃縮儀的防化學(xué)腐蝕離心腔及鋁合金一體成型的轉(zhuǎn)子,可耐酸堿及有機(jī)溶劑,且在真空密閉環(huán)境下濃縮,避免外源RNase/DNase污染,同時(shí),離心力的作用,也有效防止了每個(gè)EP管內(nèi)樣品之間的交叉污染。
(二) 高通量處理能力
為適應(yīng)不同樣品量的需求,上海般諾生物科技有限公司開發(fā)了二十多種不同款型的濃縮儀轉(zhuǎn)子,其轉(zhuǎn)子采用鋁合金材質(zhì),導(dǎo)熱效果更好,且一體成型,快插快取,無需人工緊固安裝,極大節(jié)省實(shí)驗(yàn)人員的操作時(shí)間。從0.2~250ml,可滿足不同樣品量的需求,單次最多可處理近200個(gè)樣品。為滿足需求,采用混合轉(zhuǎn)子設(shè)計(jì),同一個(gè)轉(zhuǎn)子可同時(shí)放置1.5/2ml及10~15ml等不同容量的EP管。同時(shí)般諾還開發(fā)了96孔板轉(zhuǎn)子,酶標(biāo)板轉(zhuǎn)子等。
(三) 多功能兼容性
除常規(guī)DNA/RNA濃縮外,還可去除PCR產(chǎn)物中的乙醇?xì)埩簦?0℃處理數(shù)分鐘)、濃縮熒光標(biāo)記cDNA、干燥核苷、酶制劑等溫度敏感樣品、凍干微生物樣本(需預(yù)冷至-70℃并移除轉(zhuǎn)子)
附表:核酸濃縮方法性能對(duì)比
參數(shù) | 真空離心濃縮法 | 乙醇沉淀法 | 自然蒸發(fā)法 |
處理時(shí)間(50μL→5μL) | 30-60分鐘 | 2-4小時(shí) | >12小時(shí) |
回收率 | ≥95% | 70-80% | <60% |
鹽分殘留風(fēng)險(xiǎn) | 無 | 高 | 低 |
氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn) | 低(封閉系統(tǒng)) | 高 | 低 |
真空離心濃縮儀從單純的樣品干燥工具,發(fā)展為核酸研究中集濃縮、除雜、凍干于一體的智能平臺(tái)。其核心價(jià)值在于解決了微量生物樣本處理中的“濃度困境”——既要實(shí)現(xiàn)高倍濃縮,又要維持分子完整性。隨著單細(xì)胞測序、即時(shí)診斷等技術(shù)的普及,該設(shè)備將在病原體快速富集、便攜式核酸提取等領(lǐng)域展現(xiàn)更大潛力。
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