色譜柱在使用前需用流動(dòng)相置換出廠溶劑，使用后應(yīng)及時(shí)更換為保存溶劑以避免性能下降。

本文將重點(diǎn)介紹色譜柱的清洗維護(hù)方法，包括流動(dòng)相置換要點(diǎn)及如何保存溶劑選擇等。

如圖1所示，柱內(nèi)的溶劑通常在使用前、使用中、使用后各不相同，每次都需要置換溶劑。

▼柱內(nèi)溶劑

圖1

▼要點(diǎn)

① 首先確認(rèn)溶劑種類

② 用流動(dòng)相充分置換HPLC設(shè)備后，再連接色譜柱

③ 使用緩沖液作為流動(dòng)相時(shí)，請(qǐng)注意鹽類的結(jié)晶析出

④ 液體量以柱體積的15～20倍量為參考標(biāo)準(zhǔn)

⑤ 選擇性能良好的洗脫樣品、且對(duì)色譜柱無(wú)影響的溶劑

⑥ 當(dāng)使用緩沖液作為流動(dòng)相時(shí)，請(qǐng)注意鹽類的結(jié)晶析出

⑦ 通常使用購(gòu)買色譜柱時(shí)封裝在內(nèi)的溶劑

⑧ 不要使用含鹵素的溶劑作為保存溶劑

⑨ 色譜柱需緊密密封，避免色譜柱干涸

⑩ 注意色譜柱壓力上升

1. 出貨時(shí)的封存溶劑/保存溶劑置換流動(dòng)相

方法

柱內(nèi)封存的溶劑置換為使用的流動(dòng)相時(shí)，其達(dá)到平衡所需的液體量會(huì)因填料、色譜柱尺寸、檢測(cè)設(shè)備、流動(dòng)相等而異，可大致以柱體積的15～20倍量作為參考。使用離子對(duì)色譜法時(shí)，平衡所需時(shí)間較長(zhǎng)。

注意事項(xiàng)

（1）首先，確認(rèn)柱內(nèi)封存的溶劑種類。如果溶劑與流動(dòng)相互不相溶，請(qǐng)先用能與兩者混溶的溶劑置換后，再置換流動(dòng)相。

　　  請(qǐng)注意色譜柱壓力的上升。

（2）當(dāng)使用緩沖液等作為流動(dòng)相時(shí)，如果柱內(nèi)是有機(jī)溶劑，可能會(huì)產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶，或?qū)е律V柱性能下降，因此需要考慮

　　  預(yù)先置換為水。

（3）請(qǐng)將HPLC設(shè)備內(nèi)部（管路）用流動(dòng)相充分置換后，再連接色譜柱。若未充分置換，可能會(huì)混入先前使用的流動(dòng)相導(dǎo)致色

　　  譜柱性能下降。

　　  尤其需要注意進(jìn)樣器的樣品環(huán)、阻尼器和混合器。

2. 流動(dòng)相置換為保存溶劑、色譜柱的清洗

方法

請(qǐng)使用能充分洗脫樣品且對(duì)色譜柱無(wú)影響的溶劑等進(jìn)行清洗并保管。保存溶劑通常使用購(gòu)買色譜柱時(shí)封裝在內(nèi)的溶劑。

注意事項(xiàng)

（1）使用的流動(dòng)相置換為清洗液時(shí)，請(qǐng)注意兩者的相互混溶性以及色譜柱壓力的上升。

（2）使用緩沖液后，請(qǐng)用蒸餾水沖洗色譜柱以將去除鹽分。若直接使用有機(jī)溶劑沖洗，可能產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶，導(dǎo)致色譜柱性能

        下降。

3. 色譜柱的保存

方法

為防止色譜柱內(nèi)部產(chǎn)生空隙或裂紋，務(wù)必緊密密封，防止干燥。另外，長(zhǎng)期保存時(shí)，需要每隔1,2個(gè)月使液體流通柱內(nèi)一次，還需要使用具有洗脫能力的溶劑充分清洗柱內(nèi)，盡可能清除雜質(zhì)。圖2展示了因長(zhǎng)期使用等導(dǎo)致色譜柱被污染時(shí)的再生方法、色譜柱的清洗方法。另外，表1展示了長(zhǎng)期保存時(shí)通用的溶劑。

                    圖2. 按填料分類的色譜柱清洗法

注意事項(xiàng)

（1）請(qǐng)不要使用會(huì)侵蝕填料和不銹鋼管、含鹵素等溶劑作為保存溶劑。

（2）頻繁清洗或使用過(guò)量清洗液沖洗或縮短色譜柱壽命。

以上，通過(guò)規(guī)范化的清洗、保存操作，可有效維持色譜柱性能并延長(zhǎng)使用壽命。

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