鐵是最重要的元素之一，作為酶輔因子發(fā)揮著重要作用。血液中的鐵與轉鐵蛋白結合，并被運輸?shù)饺硪院铣汕虻鞍祝缂〖t蛋白和血紅蛋白。鐵對于氧運輸?shù)鞍椎暮铣芍陵P重要。鐵的缺乏會導致缺鐵性貧血、慢性失血性貧血和感染性貧血。

艾美捷JaICA鐵檢測試劑盒（Nitroso-PSAP）：#CFE-010是一種無需對樣本進行脫蛋白處理的直接比色法測定試劑盒。通過弱酸性緩沖液從轉鐵蛋白-鐵復合物中解離鐵，并通過還原劑將其還原（Fe3+→Fe2+）。亞鐵離子與硝基-PSAP（作為顯色劑）形成藍色復合物。有色復合物的強度與樣本中的鐵濃度成正比。有色復合物的強度與樣本中所含鐵的量成正比。

試劑盒組成（100次檢測）

R-1 緩沖液：1x16毫升 即用型

R-2 緩沖液：1x7毫升 即用型

R-3 螯合顯色劑：1x0.7毫升 即用型

STD 200微克/分升鐵標準液：1x1.5毫升 即用型

所需但未提供材料：

1. 蒸餾水

2. 微量移液器及吸頭

3. 透明平底96孔板

4. 具有750納米功能的微孔板讀數(shù)器

測定準備：

1. 使用前將所有試劑平衡至室溫。

2. 準備工作試劑：將70微升R-2與7微升R-3混合用于1次檢測。

（例如）50次檢測的準備

R-2：70微升x50次檢測=3.5毫升

R-3：7微升x50次檢測=350微升

在容器中混合3.5毫升R-2和350微升R-3。

樣本準備：

血清/血漿：應通過過濾或離心去除血清和血漿樣本中的不溶性物質。不能使用EDTA血漿。

尿液（24小時混合尿液）/生物液體：向樣本中加入6M鹽酸，調節(jié)pH至2.0-3.0（例如，向1毫升裂解液中加入5-10微升6M鹽酸）。以6000轉/分鐘離心15分鐘。收集上清液用于測定。

組織：加入5%TCA溶液，渦旋1分鐘，在4-8°C下孵育30分鐘。以6000轉/分鐘離心15分鐘。收集上清液用于測定。

注意：樣本pH應在pH 2到pH 8之間。

干擾因素：

EDTA會抑制鐵與顯色系統(tǒng)的反應。該檢測不受膽紅素-F和膽紅素-C（高達40毫克/分升）、血紅蛋白（高達0.1克/分升）和乳糜（高達500 FTU）存在影響。

儲存條件：于2-8°C處保存。切勿冷凍。

有效期：1年。打開小瓶后，試劑盒應在一個月內使用。

測量范圍：10-1000微克/分升

文獻參考：

(1) Yamada M, Tanioka K, Kishi K, Hatanaka U, Ohnishi M. An automated method for measurement of serum iron and unsatur- ated iron binding capacity using nitroso-PSAP. Jpn J Lab Auto,13, p659-63 (1988).

(2) Nakaya. M, Tajima. M, Kosako. H, Nakaya. T, Hashimoto. A, Watari. K, Nishihara. H, Ohba. M, Komiya. S, Tani. N, Nishida. M, Taniguchi. H, Sato. Y, Matsumoto. M, Tsuda. M, Kuroda. M, Inoue. K, Kurose. H: GRK6 deficiency in mice causes

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(3) Ikeda. Y, Tajima. S, Izawa-Ishizawa. Y, Kihira. Y, Ishizawa. K, Tomita. S, Tsuchiya. K, Tamaki. T: Estrogen regulates hepcidin expression via GPR30-BMP6-dependent signaling in hepatocytes, PLoS One, 7(7) (2012).

(4) Tsugawa. H, Suzuki. H, Matsuzaki. J, Hirata. K, Hibi. T: FecA1, a bacterial iron transporter, determines the survival of Helicobacter pylori in the stomach, Free Radic Biol Med. 15, 52(6)  p1003-10 (2012).

(5) Hayashi. K, Nakamura. M, Sakamoto. W, Yogo. T, Miki. H, Ozaki. S, Abe. M, Matsumoto. T, Is himura. K:

Superparamagnetic nanoparticle clusters for cancer theranostics combining magnetic resonance imaging and hyperthermia treatment, Theranostics. 23, 3(6), p366--76 (2013).