一、開箱檢查

打開包裝箱，查看斜面是否破損，菌株編號(hào)與說明書是否一致。

二、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

仔細(xì)閱讀菌株說明書，準(zhǔn)備2個(gè)新鮮平板或斜面。

三、器材滅菌

斜面試管表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，管口灼燒滅菌冷卻備用。接種鋤和接種鏟在酒精燈外焰翻轉(zhuǎn)灼燒滅菌3-5分鐘，冷卻備用，冷卻后用接種鋤在斜面上相距0.5cm處切兩條平行線（與試管垂直）。

四、切分斜面

換接種鏟在兩條平行線之間相距0.5cm處切兩條平行線（與試管平行），形成0.5cm*0.5cm的小正方形菌塊。

五、霉菌轉(zhuǎn)接

用接種鏟挑取菌塊平放到平板或斜面（固體瓊脂表面）上（菌塊正面朝上）。轉(zhuǎn)接多個(gè)平板或斜面，重復(fù)以上操作即可。

六、完成培養(yǎng)

平板正放，斜面傾斜放置于霉菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（參照菌種說明書上的培養(yǎng)條件設(shè)置溫度）

（1）實(shí)驗(yàn)材料?

根霉，毛霉，黑曲霉，青霉，土豆瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿，載玻片，蓋玻片，鑷子，顯微鏡，小刀，U形管等。?

（2）實(shí)驗(yàn)步驟?

1、配置培養(yǎng)基：根據(jù)原料用量配置土豆培養(yǎng)基。配置時(shí)，先急火煮沸，在溫火加熱20min，若有渾濁出現(xiàn)，則需過濾，然后定容。包扎土豆培養(yǎng)基，甘油等其他用品。滅菌后取出備用2、培養(yǎng)小室準(zhǔn)備及滅菌?在培養(yǎng)皿底部鋪一張略小于皿底的圓形濾紙片，濾紙片上依次放上“U”形載玻片擱架、載玻片、蓋玻片-四片，蓋上皿蓋，牛皮紙包扎，于恒溫干燥箱中121℃滅菌30min烘干備用；

2、瓊脂薄片制作：

a)將稍微冷卻的培養(yǎng)基，倒在培養(yǎng)皿中，做成薄平板。培養(yǎng)基應(yīng)該要倒 得薄而均勻。注意無菌操作。

b)用解剖刀將瓊脂薄平板切成邊長不大于1cm的瓊脂薄片

c)用解剖刀將瓊脂薄片移至小室載玻片上（一個(gè)載玻片上方兩塊薄片）

3、取菌接種：用接種環(huán)挑取少量待觀察的霉菌孢子（霉菌菌種的表面輕輕刮取即可），接種于固體培養(yǎng)基邊緣，以便于霉菌生長。接種時(shí)只要將帶菌的接種環(huán)在載玻片上輕輕碰幾下即可。接種量要少，以免培養(yǎng)后菌絲過于稠密而影響觀察。

4、加蓋玻片：用無菌鑷子將皿內(nèi)的蓋玻片蓋在瓊脂薄層上，用鑷子輕壓蓋玻片，使蓋玻片和載玻片之間的距離相當(dāng)接近，但不能壓扁。蓋玻片不能緊貼載玻片，要彼此留有小縫隙，一是為了通氣，二是使各部分結(jié)構(gòu)平行排列，易于觀察。

5、倒保濕劑：每皿倒入約2-3mL?20%的經(jīng)滅菌處理的甘油，使皿內(nèi)濾紙濕潤，以保持皿內(nèi)濕度，蓋上皿蓋。制成載玻片濕室。

6、正置培養(yǎng)：將平皿置于27℃霉菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一周。

7、觀察：將培養(yǎng)好的載玻片取出，置于顯微鏡下直接觀察。?

（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析?

實(shí)驗(yàn)結(jié)果?

1、根霉：菌絲無隔，有假根、匍匐菌絲。假根著生處有向上直立的孢囊梗，其頂端膨大成孢子囊，底部為半球形囊軸。

2、毛霉：孢囊梗直接由菌絲出，頂端為球形孢子囊?

3、黑曲霉：菌絲有隔，氣生菌絲分化為分生孢子梗（無隔），頂端 膨脹為球狀頂囊。

4、青霉：菌絲有隔，分生孢子梗頂端不膨大，無頂囊，多次分枝成幾輪小梗，小梗頂端長孢子。分生孢子梗呈掃帚狀。

如何讓霉菌產(chǎn)孢子？

一般微生物都會(huì)在逆境下產(chǎn)孢子，比如低溫、紫外照射等惡劣的生存條件，有的情況下，陽光照射也能促使產(chǎn)孢。不同的菌的產(chǎn)孢條件還不太一樣，要因菌而異，和培養(yǎng)基也有關(guān)。可以找找相關(guān)資料查查產(chǎn)孢培養(yǎng)基，可以試試水瓊脂培養(yǎng)基（直接在水中加瓊脂、無其他營養(yǎng)物質(zhì)）。

北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有Biolog微生物鑒定系統(tǒng)，超低溫冰箱，生物安全柜等儀器設(shè)備可進(jìn)行對(duì)微生物分離、鑒定等常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)研究。對(duì)我國生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需求進(jìn)行積極的面對(duì)社會(huì)乃至國外收集保藏提供微生物菌種資源。在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供微生物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。

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