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大鼠血管緊張素Ⅱ受體1抗體elisa試劑盒檢測說明(XY)

來源:上海信裕生物科技有限公司   2012年09月24日 09:11  

使用目的:
  本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)含量。
實驗原理
  本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中大鼠血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)水平。用純化的大鼠血管緊張素受體1(ATⅡR1)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1),再與HRP標記的血管緊張素受體1(ATⅡR1)抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD,通過標準曲線計算樣品中大鼠血管緊張素受體1抗體(ATⅡR1)濃度。 
elisa試劑盒組成 
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 終止液 6ml×1
酶標試劑 6ml×1瓶 標準品(800pg/ml) 0.5ml×1
酶標包被板 12×8條 標準品稀釋液 1.5ml×1
樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1
顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張 
顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1
elisa試劑盒標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
elisa試劑盒操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
加樣:分別設空白孔空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應此時藍色立轉黃色。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
上海信裕生物科技有限公司http://www.shxykit.com是一家生物*企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。并代理銷售Omega、SigmaR&D、GBDATCC、HYCLONE等二十多家國外,致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供*的科研試劑和完善的技術服務,滿足生物化學、分子生物學 、細胞生物學、免疫學 ELISA試劑盒等生物科技實驗需求。

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