羊elisa試劑盒原理： 此法采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。VDR的特異性的抗體已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井，，和任何VDR目前的被綁定的固定化抗體。生物素共軛的特異性的抗體的VDR除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后，加入到孔中?？股锼氐鞍坠曹椀睦备^氧化物酶（HRP）的洗滌后，加入到孔中。經(jīng)過洗滌，以除去任何未結(jié)合的抗生物素蛋白的酶試劑，底物溶液加入到孔中，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的VDR。彩色顯影被停止并測量的顏色的強(qiáng)度。

檢測步驟： 在使用前，將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測定前。據(jù)建議，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測定一式兩份。
1。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑，密封保鮮袋，將未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí)，在37℃下 一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測。
4。每孔中取出的液體，不洗。
5。向每孔中加入100μl生物素抗體（1倍）。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí)，在37℃下 （生物素抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫，輕輕混勻，直到出現(xiàn)均勻解決方案。）
6。吸液的各孔和洗滌，共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí)，在37℃下
8。重復(fù)的愿望/洗滌過 ??程中，在步驟6的5倍。
9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘，在37℃下 避光
10。一站式解決方案，每孔加入底物，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合。
11。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm，使用酶標(biāo)儀測定各孔的光密度。如果波長校正，設(shè)置為540 nm或570 nm處。在540 nm或570 nm波長在450 nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450 nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接，可能會(huì)比較高，不太準(zhǔn)確。