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干細胞分離液使用說明書

來源:上海易佰聚經(jīng)貿(mào)有限公司   2012年10月24日 10:00  

 

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備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗

 

各種動物或人外周血造血干細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞分離液操作說明和使用及保存中的注意事項:

 

本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400 與泛影酸葡甲胺。適用于從組織勻漿中(胎牛血清或人血清懸起的勻漿細胞 1X107/ml)分離所需細胞,在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用。

其他人及動物多種比重細胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。

 

使用方法:

1,例:取1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液(或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細胞 1X108/ml11混合再與1ml干細胞重懸液(產(chǎn)品編號:TBD2012SCB混勻置20度下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細胞備用。(使用本干細胞重懸液可zui終可獲得全血中約2%干細胞,若省去重懸步驟則只可獲得小于2%的干細胞。)

2,用吸取渾濁的上清部分液體小心疊加在本分離液之液面上(比例為11),20400g/分鐘,離心20分鐘(水平轉(zhuǎn)子),此時離心管中由上至下細胞分四層。

*層:為血漿或組織勻漿液層。

第二層:為環(huán)狀乳白色含所需干細胞。

第三層:為透明分離液層。

第四層;為極少紅細胞層,收集第二層細胞放入含細胞洗滌液(Cat#2010X11184-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所需干細胞。此方法效果較好,推薦使用

分離圖例:

 

注意事項

1. 啟封后應(yīng)置4℃保存避免微生物的污染。

2. 細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液溫度升至室溫時,搖勻后使用。

3. 整個分離過程中,溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無菌環(huán)境下,避免微生物的污染,否則會影響分離質(zhì)量。

 

應(yīng)用

-從動物組織中分離所需細胞

 

特點

-密度變化率依照Ficoll 400,泛影酸和氫氧化鈉.

-*分離溶液的密度為參照具體產(chǎn)品的標簽

-生理學(xué)參數(shù)

-在低粘度時高密度

-無菌-即用型-溶液

 

產(chǎn)品質(zhì)控

溶液                         注射用水

pH                             7.0-7.5

滲透壓               280-340mOsmol/kg

內(nèi)毒素                        <5EU/ml

無菌                           已檢測

保存期限                          2

 

注意

TBD實驗室的細胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于各品牌離心機的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,血液,細胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

 

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

 

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